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细胞松弛素B对水牛体细胞核移植效果的影响
引用本文:陆凤花,覃琦丽,黄华,罗婵,成俊萍,石德顺,韦英明.细胞松弛素B对水牛体细胞核移植效果的影响[J].中国兽医学报,2009,29(1).
作者姓名:陆凤花  覃琦丽  黄华  罗婵  成俊萍  石德顺  韦英明
作者单位:广西大学动物繁殖研究所,广西,南宁,530005
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划),广西科学基金,广西大学校科研和教改项目 
摘    要:以水牛耳皮成纤维细胞为供体细胞,采用电融合方法,探讨细胞松弛素B(CB)对水牛体细胞核移植效果的影响.体外成熟培养22~24 h的水牛卵母细胞去核后.将经0.1 mg/L Aphidicolin(APD)+0.5%FBS培养2~9 d的水牛耳皮成纤维细胞注射到卵周隙中再经电融合(100 V/mm,15μs,电脉冲3次)构建核移植重构胚.重构胚经化学激活后(5 μmol/L)离子霉素5 min,2 mmol/L 6-DMAP 3 h)培养,7~9 d评定其胚胎发育能力.结果显示,在含CB(3 mg/L)的融合液中进行电融合后,核移植的融合率、重组胚的存活率、卵裂率和囊胚率与对照组(不含CB)相比均无显著差异(P>0.05);核移植重组胚激活前用含CB(6 mg/L)的培养液培养1 h,其激活后的存活率(97.52%)和体外囊胚发育率(22.09%)均显著地高于未经CB处理的重组胚的存活率(93.87%)和囊胚率(13.25%,P<0.05);重组胚经离子霉素激活5 min后,在6-DMAP+CB中培养3 h的分裂率明显低于放在6-DMAP中培养3 h的分裂率(65.37% vs 78.92%,P<0.05),但囊胚发育率无显著差异(11.19% vs 10.96%,P>0.05).这表明水牛体细胞核移植电融合时,融合液中不添加CB,而核移植重组胚激活前经CB培养处理后,有利于胚胎的进一步发育,但激活后用CB培养处理会降低胚胎的发育率.

关 键 词:水牛  体细胞  核移植  电融合  细胞松弛素B

Effect of the cytochalasin B on the development of buffalo somatic cell nuclear transfer embryos
LU Feng-hua,QIN Qi-li,HUANG Hua,LUO Chan,CHENG Jun-ping,SHI De-shun,WEI Ying-ming.Effect of the cytochalasin B on the development of buffalo somatic cell nuclear transfer embryos[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2009,29(1).
Authors:LU Feng-hua  QIN Qi-li  HUANG Hua  LUO Chan  CHENG Jun-ping  SHI De-shun  WEI Ying-ming
Abstract:
Keywords:
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