| 濒危植物巴东木莲ISSR分子标记技术体系的建立 |
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| 引用本文： | 李晓玲,温国莉,陈发菊,梁宏伟,何正权.濒危植物巴东木莲ISSR分子标记技术体系的建立[J].江苏农业科学,2008(4). |
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| 作者姓名： | 李晓玲 温国莉 陈发菊 梁宏伟 何正权 |
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| 作者单位： | 三峡大学生物技术研究中心/天然产物研究与利用湖北省重点实验室,湖北宜昌,443002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，湖北省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 利用正交设计建立和优化适合于濒危植物巴东木莲的ISSR-PCR分子标记技术体系.对影响ISSR-PCR反应的多个因素,包括引物和DNA模板浓度、Taq酶用量、Mg2 和dNTPs浓度以及PCR扩增的退火温度、退火时间及循环次数等进行了优化.结果表明,适于巴东木莲ISSR-PCR反应的分子标记技术体系为:反应总体积20μ1,含2μ1 10×buffer、1μ1 20 mmol/L Mgcl2、4μ1 2 pxaoL/L引物、0.4μ1 10 mmoL/L dNTPs、0.8μ1 5 u/μ1Taq酶及40 ng模板DNA;PCR扩增程序为:94℃预变性5 min,94 oC变性30 8,54 oC复性45 s,72℃延伸1.5min,35个循环,最后72℃延伸7 min.本研究建立的ISSR分子标记技术体系稳定性强,重复性高.
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| 关 键 词： | 巴东木莲 分子标记 正交设计 优化 |
Establishment of ISSR molecular marker technique system in endangered plant Manglietia patungnesis |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ISSR |
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