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猪胸膜肺炎放线杆菌结构蛋白基因ApxIVA特异性片段的表达和纯化
引用本文:石琴,逯忠新,贺英,赵萍,储岳峰,高鹏程.猪胸膜肺炎放线杆菌结构蛋白基因ApxIVA特异性片段的表达和纯化[J].江西农业大学学报,2007,29(2):246-249,256.
作者姓名:石琴  逯忠新  贺英  赵萍  储岳峰  高鹏程
作者单位:中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃,兰州,730046
基金项目:国家科技成果重点推广计划(2005EC000330)
摘    要:以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清8型分离株Hpn-405株基因组DNA为模板,PCR方法扩增ApxIVA特异性片段,PCR产物经纯化后与载体pMD18-T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pET-28a中,构建成重组表达质粒pET-ApxIVA3,转入到大肠埃希氏菌BL21(DE3)中,以IPTG进行诱导重组蛋白的表达,SDS-PAGE检测结果显示,表达的融合蛋白分子质量约为18 ku,与预期片段大小相符;将经过超声破碎的菌液离心取沉淀经尿素洗涤溶解后用镍金属螯合层析柱进行纯化。Western-blot分析证实,该融合蛋白具有免疫学活性。

关 键 词:猪胸膜肺炎放线杆菌  ApxIVA  表达  蛋白纯化
文章编号:1000-2286(2007)02-0246-04
收稿时间:2006-12-26
修稿时间:2006-12-262007-03-05

Expression and Bioactivity of ApxIVA Specific Fragment of Actinobacillus Pleuropneumoniae
SHI Qin,LU Zhong-xin,HE Ying,ZHAO Ping,CHU Yue-feng,GAO Peng-cheng.Expression and Bioactivity of ApxIVA Specific Fragment of Actinobacillus Pleuropneumoniae[J].Acta Agriculturae Universitis Jiangxiensis,2007,29(2):246-249,256.
Authors:SHI Qin  LU Zhong-xin  HE Ying  ZHAO Ping  CHU Yue-feng  GAO Peng-cheng
Institution:Key Laboratory of Animal Virology of Ministry of Agriculture, State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology, Lanzhou Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730046, China
Abstract:
Keywords:Actinobacillus pleuropneumoniae  ApxIVA  fusion expression  purify protein
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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