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| 猪α干扰素基因在毕赤酵母中的分泌表达 | |
| 引用本文： | 葛丽,李震,于瑞嵩,刘惠莉,张德福,周智爱,尹逊和.猪α干扰素基因在毕赤酵母中的分泌表达[J].中国兽医学报,2005,25(3):289-292. |
| 作者姓名： | 葛丽 李震 于瑞嵩 刘惠莉 张德福 周智爱 尹逊和 |
| 作者单位： | 1. 上海市农业科学院,畜牧兽医研究所,上海,201106;山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271018 2. 上海市农业科学院,畜牧兽医研究所,上海,201106;上海市农业遗传育种重点实验室,上海,201106 3. 山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271018 |
| 基金项目： | 上海市农业科学院中青年学术和技术带头人培养基金项目 |
| 摘 要： | 将猪α干扰素(PoIFN-α)基因克隆入毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA中,电转化毕赤酵母KM71H菌株,抗生素ZeocinTM浓度梯度筛选高抗性转化子,以PCR鉴定阳性重组菌株。筛选出的高拷贝重组菌株分别通过BMGY/BMMY培养基和YPG培养基,用甲醇诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot印迹杂交结果证实,表达产物为重组PoIFN-α融合蛋白,经细胞毒性试验检测(WISH/VSV系统),表达产物的抗病毒活性为4.1×104IU/mL。 |
| 关 键 词： | 毕赤酵母 干扰素基因 分泌表达 分泌型表达载体 Western IFN-α 猪 重组菌株 表达产物 PCR鉴定 抗病毒活性 基因克隆 浓度梯度 诱导表达 PAGE 印迹杂交 blot 融合蛋白 试验检测 细胞毒性 培养基 电转化 转化子 高抗性 抗生素 |
| 文章编号： | 1005-4545(2005)03-0289-04 |
| 修稿时间： | 2004年1月3日 |
Secretive Expression of Porcine IFN-α in Yeast Pichia pastoris |
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| Ge Li,LI Zhen,YU Rui-song,LIU Hui-li,ZHANG De-fu,ZHOU Zhi-ai,YIN Xun-he.Secretive Expression of Porcine IFN-α in Yeast Pichia pastoris[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2005,25(3):289-292. | |
| Authors: | Ge Li LI Zhen YU Rui-song LIU Hui-li ZHANG De-fu ZHOU Zhi-ai YIN Xun-he |
| Institution: | GE Li~1,3,LI Zhen~1,2*,YU Rui-song~1,2,LIU Hui-li~1,2,ZHANG De-fu~1,2,ZHOU Zhi-ai~1,2,YIN Xun-he3 |
| Abstract: | |
| Keywords: | porcine interferon Pichia pastoris expression |
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