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砀山酥梨萼片发育的SSH文库构建及EST序列分析
引用本文:贾胜,贾兵,朱立武.砀山酥梨萼片发育的SSH文库构建及EST序列分析[J].安徽农业大学学报,2013(3).
作者姓名:贾胜  贾兵  朱立武
作者单位:安徽农业大学果树学重点实验室;
基金项目:国家梨产业技术体系项目(nycytx-29-14)资助
摘    要:为了寻找梨幼果期萼片发育中差异表达基因,为梨幼果萼片脱落分子机制研究提供依据,以砀山酥梨萼片脱落开始期幼果为材料,利用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术构建砀山酥梨幼果期宿萼果与脱萼果差异表达cDNA文库。随机挑取200个阳性克隆,经菌液PCR检测及测序后得到185个EST序列片段,其中小于100 bp、大于300 bp以及介于两者之间的EST片段分别占3%、96%和1%。将这些片段在NCBI上进行BLAST比对,得到调节因子(regulator)、蛋白质(protein)和相关酶类(related enzyme)3类代谢途径相关物质,分别占21%、63%和16%。其中,在Gene Ontology网站上比对到3-异丙基苹果酸脱氢酶(3-isopropylmalate dehydrogenase)和N-酰基-L-氨基酸氨基水解酶(N-acyl-L-amino acid amidohydrolae)2种酶,推测可能是砀山酥梨幼果期萼片发育代谢途径中的重要的相关酶。

关 键 词:砀山酥梨  萼片  抑制差减杂交技术  SSH文库  序列分析
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