| 猪源抗菌肽Protegrin-1基因在大肠杆菌中的融合表达 |
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| 引用本文： | 凡复,吴跃明,刘建新.猪源抗菌肽Protegrin-1基因在大肠杆菌中的融合表达[J].农业生物技术学报,2010,18(6). |
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| 作者姓名： | 凡复 吴跃明 刘建新 |
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| 基金项目： | 浙江省科技计划项目，杭州市科技创新基金 |
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| 摘 要： | 为了使猪源抗菌肽Protegrin-1(PG-1)在原核表达载体中获得高效表达,在不改变PG-1氨基酸的基础上,根据大肠杆菌偏好密码子表,替换PG-1部分密码子,设计两段互补的引物,利用搭桥PCR技术扩增完整的PG-1成熟肽基因,重组至融合表达载体pGEX-4T-1中,构建成抗菌肽PG-1基因融合表达载体pGEX4T-PG-1,转化至大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)plyS中,筛选得到阳性克隆,并用1.0 mmol/L的IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE电泳图谱显示在28 kD处有特异性的蛋白条带出现,经Western blot检测表明重组子已经成功地在大肠杆菌中表达了融合蛋白.纯化得到的GST-PG-1用凝血酶切割后,经用亲合层析得到分子量约为2 kD抗菌肽PG-1蛋白1.38 mg/L.对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)抑菌试验结果表明,重组抗菌肽PG-1具有明显的抑菌效果.
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| 关 键 词： | 抗菌肽 Protegrin-1 融合表达 |
Fusion Expression of Protegrin-1 Gene from Swine in Escherichia coli |
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| Fan Fu,Wu Yueming,Liu Jianxin.Fusion Expression of Protegrin-1 Gene from Swine in Escherichia coli[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2010,18(6). |
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| Authors: | Fan Fu Wu Yueming Liu Jianxin |
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