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| 旋毛虫肌幼虫p53cDNA的克隆及鉴定 | |
| 引用本文： | 孙树民,吴秀萍,王学林,付宝权,卢强,李莲瑞,郭恒,P.Boireau,陈启军,刘明远.旋毛虫肌幼虫p53cDNA的克隆及鉴定[J].中国兽医学报,2007,27(4):532-535. |
| 作者姓名： | 孙树民 吴秀萍 王学林 付宝权 卢强 李莲瑞 郭恒 P.Boireau 陈启军 刘明远 |
| 作者单位： | 1. 吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室,吉林,长春,130062;内蒙古民族大学动物科技学院,内蒙古,通辽,028000 2. 吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室,吉林,长春,130062 3. 中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃,兰州,730046 4. 法国食品卫生安全局,巴黎,94703 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金;国际科学基金(IFS);中-法合作项目 |
| 摘 要： | 根据GenBank中旋毛虫53000抗原基因的序列设计引物，用PCR技术直接从旋毛虫肌幼虫cDNA文库中扩增靶基因p53cDNA，将其克隆到pMD-18T载体，转化至大肠埃希氏菌NovaBlue后测序分析，结果表明，克隆到1176bp的p53cDNA，共编码391个氨基酸。序列分析表明，p53cDNA序列与GenBank中的旋毛虫p53基因序列相比共有12个核苷酸发生改变，二者的同源性为98％，所编码蛋白质氨基酸序列的同源性为98％。将其克隆到原核表达载体pET28a并转化至表达菌BL21star（DE3），经IPTG诱导表达后获得约48000的重组蛋白。Western blotting检测证实，p53重组蛋白可以被旋毛虫感染猪血清识别，具有很好的抗原性。 |
| 关 键 词： | 旋毛虫 克隆 表达 抗原性 |
| 文章编号： | 1005-4545（2007）04-0532-04 |
| 修稿时间： | 2006-01-25 |
Cloning and identification of p53 cDNA from Trichinella spiralis |
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| SUN Shu-min,WU Xiu-ping,WANG Xue-lin,FU Bao-quan,LU Qiang,LI Lian-rui,GUO Heng,P.Boireau,CHEN Qi-jun,LIU Ming-yuan.Cloning and identification of p53 cDNA from Trichinella spiralis[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2007,27(4):532-535. | |
| Authors: | SUN Shu-min WU Xiu-ping WANG Xue-lin FU Bao-quan LU Qiang LI Lian-rui GUO Heng PBoireau CHEN Qi-jun LIU Ming-yuan |
| Institution: | 1. Key Laboratory for Zoonoses of Education Ministry, Zoonoses Institute, Jilin University, Changchun 130062, China ; 2. Animal Science and Technology College ,Inner Mongolia University for Nationalities , Tongliao ,Inner Mongolia 028000 ,China ; 3. Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Lanzhou 730046, China ; 4. UMR BIPAR INRA-AFSSA-ENVA-UPVM,Maison-Alfort ,Paris 94703 ,France |
| Abstract: | p53 cDNA of Trichinella spirals was amplified by PCR from cDNA library of T. spiralis muscle larvae. The PCR product was cloned into pMD-18T vector and sequenced. 1 176 bp of p53 cDNA of T. spiralis p53 gene was obtained from cDNA libirary. The recombinant protein of 48 000 was expressed in prokaryotic expression vector pET28a and recognized by pig serum infected with T. spiralis in Western blotting. This indicated p53 recombinant protein is antigenic and would be a candidate for the diagnosis of trichinellosis. |
| Keywords: | p53 cDNA |
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