| miR-200a对奶山羊乳腺上皮细胞乳脂合成相关基因mRNA表达的影响 |
| |
| 引用本文： | 林先滋,罗军,张犁苹,朱江江,石恒波,苟德明.miR-200a对奶山羊乳腺上皮细胞乳脂合成相关基因mRNA表达的影响[J].畜牧兽医学报,2012,43(7):1028-1036. |
| |
| 作者姓名： | 林先滋 罗军 张犁苹 朱江江 石恒波 苟德明 |
| |
| 作者单位： | 1. 西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室,杨凌,712100
2. 深圳大学生命科学学院,深圳,518060 |
| |
| 基金项目： | 转基因生物新品种培育重大专项，陕西省科技创新工程重大科技专项，公益性行业(农业)科研专项 |
| |
| 摘 要： | 旨在构建pAd-pri-miR-200a重组腺病毒,使其在奶山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,研究miR-200a对乳脂合成相关基因mRNA表达的影响。以西农萨能羊DNA为模板扩增pri-miR-200a。采用Ad-Easy系统构建重组腺病毒载体pAd-pri-miR-200a,并于HEK 293细胞株中进行病毒的包装、扩繁。TCI50法测定病毒滴度。qRT-PCR检测miR-200a及16个乳脂合成相关基因mRNA表达水平。序列分析结果显示,pri-miR-200a包括pre-miR-200a86bp和侧翼序列共297bp。酶切结果证实pAd-pri-miR-200a构建成功。Ad-pri-miR-200a滴度达8×109 PFU.mL-1。实时定量结果表明,Ad-pri-miR-200a(MOI为200)感染奶山羊乳腺上皮细胞72h,miR-200a的表达量较对照高出2.4倍。同时miR-200a的过表达引起10个基因mRNA表达量下调,6个基因mRNA表达量上调。其中脂肪酸从头合成相关基因FASN、脂滴生成相关基因TIP47及脂肪酸运输相关基因FABP4降幅较大,分别下降了0.47、0.89及0.65倍。而TAG生成相关基因DGAT1和脂解相关基因HSL较对照分别增加了0.52和1.49倍。本研究获得的重组腺病毒Ad-pri-miR-200a能在山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,同时miR-200a过表达影响乳脂合成相关基因mRNA表达水平。
|
| 关 键 词： | pri-miR-200a 重组腺病毒 乳腺上皮细胞 西农萨能羊 |
The Effect of miR-200a on Gene mRNA Expression Related to Milk Fat Synthesis in Dairy Goat Mammary Gland Epithelial Cells |
| |
| LIN Xian-zi
,
LUO Jun
,
ZHANG Li-ping
,
ZHU Jiang-jiang
,
SHI Heng-bo
,
GOU De-ming.The Effect of miR-200a on Gene mRNA Expression Related to Milk Fat Synthesis in Dairy Goat Mammary Gland Epithelial Cells[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2012,43(7):1028-1036. |
| |
| Authors: | LIN Xian-zi LUO Jun ZHANG Li-ping ZHU Jiang-jiang SHI Heng-bo GOU De-ming |
| |
| Institution: | 1.Shanxi Provincial Key Laboratory of Agricultural Molecular Biology,College of Animal Science and Technology,Northwest A&F University,Yangling 712100,China;2.College of Life Sciences, Shenzhen University,Shenzhen 518060,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
