| 鲤CYR61基因的克隆、表达及系统进化树的构建 |
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| 引用本文： | 孙婷,刘伟,徐鹏,孙效文.鲤CYR61基因的克隆、表达及系统进化树的构建[J].上海海洋大学学报,2012(3):321-330. |
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| 作者姓名： | 孙婷 刘伟 徐鹏 孙效文 |
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| 作者单位： | 中国水产科学研究院水产生物应用基因组研究中心;上海海洋大学水产与生命学院;大连海洋大学生命科学与技术学院 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(2011AA100401);公益性行业(农业)科研专项(200903045) |
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| 摘 要： | 通过鲤(Cyprinus carpio)基因组序列与斑马鱼(Danio rerio)CYR61基因编码区全序列的比对得到了CYR61 A、CYR61 B和CYR61 C共3条序列。分别克隆、测序得到其开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)分别是1 158 bp、1 053 bp、1 107 bp,CYR61 A和CYR61 C得到完整编码区,都是由5个外显子和4个内含子构成,分别编码385、368个氨基酸,其理论等电点值分别是7.83、8.54,分子量(Mw值)分别为42.55 ku、40.83 ku。鲤3个CYR61基因具有高度同源性,并且均含IB、vWC、TSP1、CT 4个模块。分子系统学分析表明鲤CYR61基因与其他物种CYR61基因具有高度同源性,且CYR61 C与其他高等物种的CYR61同源性更高,利用MEGA 5.0计算出CYR61 A、CYR61 B和CYR61 C的分化时间早于鲤和斑马鱼的物种分化。CYR61 C在13个组织中均有表达,在卵巢中表达最高,肠、脑、鳃次之,在其他组织中表达较低且在心脏中表达最低。CYR61 A在精巢、肠、鳃中表达较高。CYR61 B在精巢和脑中表达最高,肠、肌肉、卵巢次之。实时荧光定量PCR分析CYR61 3个复制在鲤胚胎发育时期的表达,都是在0 h相对表达量最高,显著降低至18 h或24 h,随后逐渐升高并在6 d时下降。
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| 关 键 词： | 鲤 CYR61 克隆 分子系统进化树 半定量RT-PCR 实时荧光定量PCR 基因表达 |
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