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| 绵羊毛发角蛋白结合蛋白启动子的克隆与活性分析 | |
| 引用本文： | 王春生,安铁洙,白秀娟,任洪林,柳增善.绵羊毛发角蛋白结合蛋白启动子的克隆与活性分析[J].中国兽医学报,2008,28(2):137-140. |
| 作者姓名： | 王春生 安铁洙 白秀娟 任洪林 柳增善 |
| 作者单位： | 1. 东北林业大学生命科学学院,黑龙江,哈尔滨,150040;东北农业大学动物科技学院,黑龙江,哈尔滨,150030 2. 东北林业大学生命科学学院,黑龙江,哈尔滨,150040 3. 东北农业大学动物科技学院,黑龙江,哈尔滨,150030 4. 吉林大学人兽共患病研究所,吉林,长春,130062 |
| 摘 要： | 以绵羊基因组DNA为模板克隆获得绵羊角蛋白结合蛋白基因KAP6.1启动子。将KAP6.1启动子插入到切除了CMV启动子的pAcGFP1-N1质粒中,构建了重组真核表达载体,并采用脂质体法转染传代培养绵羊皮肤成纤维细胞并检测其表达活性。结果显示：（1）KAP6.1启动子序列大小为830 bp,与GenBank上绵羊角蛋白结合蛋白的参照序列（M95719）有99.64%的同源性;与M95719相比,KAP6.1在349位点、726位点和246位点上分别存在1个C缺失、1个转换（G代替A）和1个颠换（A代替T）;在438位点上具有1个依赖DNA的RNA聚合酶结合位点TATA box,但未发现具有依赖DNA的RNA聚合酶识别位点CAAT box;（2）转染24 h后,在蓝光激发下检测到细胞核附近有绿色荧光蛋白的高表达,并在48 h后逐渐减弱,而细胞质内绿色荧光蛋白的表达量增加。这一结果表明,KAP6.1启动子在绵羊皮肤成纤维细胞的表达上可能具有特异性。 |
| 关 键 词： | 角蛋白结合蛋白 启动子 分子克隆 活性分析 绵羊 毛发 角蛋白 结合蛋白 启动子序列 克隆 活性分析 sheep promoter protein Associated keratin fibroblast analysis activity cloning 表达量 细胞质内 荧光蛋白 绿色 |
| 文章编号： | 1005-4545(2008)02-0137-03 |
| 修稿时间： | 2007年2月11日 |
Molecular cloning and activity analysis in sheep fibroblast of the keratin Associated protein promoter of the sheep |
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| WANG Chun-sheng,AN Tie-zhu,BAI Xiu-juan,REN Hong-lin,LIU Zeng-shan.Molecular cloning and activity analysis in sheep fibroblast of the keratin Associated protein promoter of the sheep[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2008,28(2):137-140. | |
| Authors: | WANG Chun-sheng AN Tie-zhu BAI Xiu-juan REN Hong-lin LIU Zeng-shan |
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