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牛白细胞介素-17真核表达载体的构建及在牛乳腺上皮细胞中的表达
引用本文:王 婷,崔新洁,刘秉春,陶 琳,胡庆亮,修 磊,王 潇.牛白细胞介素-17真核表达载体的构建及在牛乳腺上皮细胞中的表达[J].华南农业大学学报,2014,35(1):79-85.
作者姓名:王 婷  崔新洁  刘秉春  陶 琳  胡庆亮  修 磊  王 潇
作者单位:内蒙古大学 生命科学学院;内蒙古大学 生命科学学院;内蒙古大学 生命科学学院;内蒙古大学 生命科学学院;内蒙古大学 生命科学学院;内蒙古大学 生命科学学院;内蒙古大学 生命科学学院
基金项目:国家自然科学基金(30901066);内蒙古自然科学基金(2010MS0514)
摘    要:【目的】在体外分离培养牛乳腺上皮原代细胞,并构建牛白细胞介素-17(bIL-17)基因真核表达质粒,观察重组质粒在牛乳腺上皮细胞的表达.【方法】提取牛脾脏细胞总RNA,通过RT-PCR扩增bIL-17,将bIL-17连入pMD19-T进行测序,测序成功后将bIL-17插入含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的真核表达质粒pEGFP-N3上,构建真核表达质粒pEGFP-N3-bIL-17.用脂质体法将pEGFP-N3-bIL-17质粒转染于牛乳腺上皮细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞中的表达,RT-PCR检测bIL-17基因在细胞内的转录,定量ELISA检测bIL-17蛋白在细胞内的表达情况.【结果和结论】成功构建具有绿色荧光和新霉素抗性的双选择标记的牛白细胞介素-17真核表达载体,并可在牛乳腺上皮细胞成功表达.

关 键 词:牛白细胞介素-17  载体构建  牛乳腺上皮细胞  转染  表达
收稿时间:2/4/2013 12:00:00 AM

Construction of bovine interleukin-17 eukaryotic expression vector and its expression in the bovine primary mammary epithelial cells
WANG Ting,CUI Xinjie,LIU Bingchun,TAO Lin,HU Qingliang,XIU Lei and WANG Xiao.Construction of bovine interleukin-17 eukaryotic expression vector and its expression in the bovine primary mammary epithelial cells[J].Journal of South China Agricultural University,2014,35(1):79-85.
Authors:WANG Ting  CUI Xinjie  LIU Bingchun  TAO Lin  HU Qingliang  XIU Lei and WANG Xiao
Institution:College of Life Sciences, Inner Mongolia University,;College of Life Sciences, Inner Mongolia University,;College of Life Sciences, Inner Mongolia University,;College of Life Sciences, Inner Mongolia University,;College of Life Sciences, Inner Mongolia University,;College of Life Sciences, Inner Mongolia University,;College of Life Sciences, Inner Mongolia University,
Abstract:
Keywords:
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