| 牛分支杆菌MPT83基因的表达及重组蛋白的纯化 |
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| 引用本文： | 鲁俊鹏,罗满林,宋延华,邹潍力.牛分支杆菌MPT83基因的表达及重组蛋白的纯化[J].中国兽医科技,2006,36(5):366-370. |
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| 作者姓名： | 鲁俊鹏 罗满林 宋延华 邹潍力 |
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| 作者单位： | [1]华南农业大学兽医学院,广东广州510642 [2]广东温氏食品集团有限公司,广东新兴527439 |
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| 基金项目： | 广东省“十五”重大科技攻关计划项目（2003A20403） |
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| 摘 要： | 从牛分支杆菌培养物中抽提总DNA，扩增了MPT83基因，并克隆入pMD-18-T Simple Vector，将测序正确的目的基因插入表达载体pET-32a（＋）中，转化BL21（DE3）宿主菌，IPTG诱导表达，用亲和层析方法对表达蛋白进行了纯化。经测序，构建的克隆质粒pMD-MPT83与Gen-Bank中的序列一致；构建的表达质粒pET-MPT83经PCR和BamHI＋HindⅢ双酶切鉴定构建正确；经SDS-PAGE分析，在约42ku处出现新的蛋白条带，4h后表达量即达到高峰；Westernblotting分析表明，融合蛋白能够被牛分支杆菌阳性血清所识别；纯化的表达蛋白经SDS-PAGE电泳，出现清晰的单一条带。表明MPT83基因原核表达载体构建成功。
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| 关 键 词： | 牛分支杆菌 MPT83基因 克隆 原核表达 蛋白纯化 |
| 文章编号： | 1673-4696（2006）05-0366-05 |
| 收稿时间： | 2006-01-12 |
Expression of MPT83 gene from Mycobacterium bovis and purification of its recombinant protein |
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| LU Jun-peng,LUO Man-lin,SONG Yan-hua ZOU Wei-li.Expression of MPT83 gene from Mycobacterium bovis and purification of its recombinant protein[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2006,36(5):366-370. |
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| Authors: | LU Jun-peng LUO Man-lin SONG Yan-hua ZOU Wei-li |
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| Keywords: | Mycobacterium bovis MPT83 gene cloning prokaryotic expression protein purification |
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