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| 重组NDV HN基因乳酸菌穿梭表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达 | |
| 引用本文： | 郭衍冰,胡静涛,于丹,曹岩峰,王一鸣,张旺,王春凤.重组NDV HN基因乳酸菌穿梭表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达[J].吉林农业大学学报,2013,35(2). |
| 作者姓名： | 郭衍冰 胡静涛 于丹 曹岩峰 王一鸣 张旺 王春凤 |
| 作者单位： | 1. 吉林农业大学动物科学技术学院,长春,130118 2. 长春市动物疾病预防控制中心,长春,130000 3. 沈阳丰美生物技术有限公司,沈阳,110164 |
| 基金项目： | 吉林省科技发展计划项目，吉林省教育厅"十二五"科学技术研究项目，国家高技术研究发展计划项目，教育部博士点基金项目，人兽共患病教育部重点实验室开放平台基金项目;吉林农业大学大学生科技创新基金 |
| 摘 要： | 为构建新城疫病毒乳酸菌穿梭表达载体,采用RT-PCR方法从新城疫病毒中扩增了HN基因,将其克隆到pMD18-T Simple Vector中.经测序鉴定正确后,定向克隆至乳酸菌表达载体pW425et中,并转化入表达宿主菌BL21 (DE3),利用IPTG诱导表达.采用SDS-PAGE和Western blotting检测重组菌在大肠杆菌中的表达情况.结果表明:NDVHN基因与表达载体pW425et正确重组,且该重组菌传50代次以上,重组质粒依然稳定.SDS-PAGE显示表达出约63 kD的条带,与已知表达的HN蛋白大小相符.Western blotting进一步证实该蛋白能被NDV阳性抗体所识别,具有反应原性.表明构建了重组NDVHN基因乳酸菌穿梭表达载体. |
| 关 键 词： | 新城疫病毒 血凝素-神经氨酸酶 乳酸菌穿梭表达载体 大肠杆菌 |
Construction of Recombinant Newcastle Disease Virus HN Lactobacillus Shuttle Expression Vector and Expression in Escherichia coli |
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