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| 重组NP蛋白抗原检测SIV抗体间接ELISA方法的建立 | |
| 引用本文： | 王方昆,袁秀芳,刘思当,张存,徐丽华,王一成.重组NP蛋白抗原检测SIV抗体间接ELISA方法的建立[J].浙江农业学报,2008,20(6). |
| 作者姓名： | 王方昆 袁秀芳 刘思当 张存 徐丽华 王一成 |
| 作者单位： | 1. 浙江省农业科学院,畜牧兽医研究所,浙江,杭州,310021;山东农业大学,动科院,山东,泰安,272018 2. 浙江省农业科学院,畜牧兽医研究所,浙江,杭州,310021 3. 山东农业大学,动科院,山东,泰安,272018 |
| 基金项目： | 浙江省科技计划重点项目 |
| 摘 要： | 用纯化的H9N2亚型猪流感可溶重组NP蛋白作为包被抗原,建立了检测猪流感抗体的间接ELISA方法.ELISA的最佳工作条件是:抗原包被浓度为12.5 μg/mL,37℃ 1 h,4 ℃过夜;血清稀释度为1∶40;酶标SPA稀释度为1∶10 000,37 ℃温育40 min,底物显色37 ℃ 15 min.经重复性试验、交叉试验、竞争抑制试验等试验,结果表明该方法特异性强、灵敏度高、重复性好.利用TG-ROC软件确定了自制ELISA(NP-ELISA)酶标板的临界值为0.20,特异性和敏感性分别为95.83%和91.43%.与美国IDEXX试剂盒相比较,符合率为94.00%,无显著性差异.用已建立的ELISA方法检测临床血清样本356份,总阳性率为35.40%. |
| 关 键 词： | 猪流感 重组NP蛋白 |
An indirect ELISA method based on recombinant nucleoprotein(NP) for detection of antibodies to swine influenza virus(SIV) |
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| WANG Fang-kun,YUAN Xiu-fang,LIU Si-dang,ZHANG Cun,XU Li-hua,WANG Yi-cheng.An indirect ELISA method based on recombinant nucleoprotein(NP) for detection of antibodies to swine influenza virus(SIV)[J].Acta Agriculturae Zhejiangensis,2008,20(6). | |
| Authors: | WANG Fang-kun YUAN Xiu-fang LIU Si-dang ZHANG Cun XU Li-hua WANG Yi-cheng |
| Institution: | WANG Fang-kun1,2,YUAN Xiu-fang1,LIU Si-dang2,ZHANG Cun1,XU Li-hua1,WANG Yi-cheng1,(1Institute of Animal Husb,ry , Veterinary Science,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences,Hangzhou 310021,China,2College of Animal Science , Veterinary Medicine,Sh,ong Agricultural University,Tai\'an 271018,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | ELISA |
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