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实时定量PCR快速检测对虾白斑综合症病毒
引用本文:毕道荣,岳志芹,梁成珠,凌宗帅,赵巍,张健,邓明俊,刘荭,徐彪,郑小龙,何俊强.实时定量PCR快速检测对虾白斑综合症病毒[J].山东农业大学学报(自然科学版),2009,40(1).
作者姓名:毕道荣  岳志芹  梁成珠  凌宗帅  赵巍  张健  邓明俊  刘荭  徐彪  郑小龙  何俊强
作者单位:1. 中国动物卫生与流行病学中心,山东,青岛,266114
2. 山东出入境榆验检疫局检验检疫技术中心,山东,青岛,266002
3. 深圳出入境检验检疫局水生动物疫病国家重点实验室,广东,深圳,518010
基金项目:国家质量监督检验疫总局资助项目,山东出入境检验检疫局资助项目 
摘    要:根据对虾白斑综合症病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)的保守序列,利用Primer Express2.0软件设计引物和Taqman探针,建立了WSSV的实时定量PCR检测体系.构建含有WSSV目的扩增片段的质粒为标准品,进行定量PCR扩增,结果表明标准品浓度在1.5×107~1.5×101个拷贝之间有"S"型扩增曲线,检测限为15个拷贝.标准曲线中模板浓度(X)与Ct值的关系为:Ct=-3.77 lgX+43.73,相关系数R2=0.9967.该检测方法特异性强,对传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)、斑节对虾杆状病毒(MBV)、肝胰腺细小病毒(HPV)以及对虾基因组DNA没有扩增反应.运用该方法对100尾对虾样品进行检测,14个对虾样品为阳性.而运用巢式PCR检测只有4个对虾样品为阳性.实时定量PCR方法检测WSSV,快速、特异、灵敏,在虾病的临床检测上具有重要意义.

关 键 词:实时定量PCR  白斑综合症病毒  对虾

DETECTION AND QUANTIFICATION OF WHITE SPOT SYNDROME VIRUS IN SHRIMPS USING REAL-TIMET PCR ASSAY
BI Dao-tong,YUE Zhi-qin,LIANG Cheng-zhu,LING Zong-shuai,ZHAO Wei,ZHANG Jian,DENG Ming-jun,LIU Hong,XU Biao,ZHENG Xiao-long,HE Jun-qiang.DETECTION AND QUANTIFICATION OF WHITE SPOT SYNDROME VIRUS IN SHRIMPS USING REAL-TIMET PCR ASSAY[J].Journal of Shandong Agricultural University,2009,40(1).
Authors:BI Dao-tong  YUE Zhi-qin  LIANG Cheng-zhu  LING Zong-shuai  ZHAO Wei  ZHANG Jian  DENG Ming-jun  LIU Hong  XU Biao  ZHENG Xiao-long  HE Jun-qiang
Institution:**;1.China Animal Health and Epidemiology Center;Qingdao 266114;China;2.Shandong Technical Center of Inspection and Quarantine Bureau;Qingdao 266002;3.The Key Lab of Aquatic Animal Diseases;Shenzhen Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau;Shenzhen 518001;China
Abstract:
Keywords:Taqman probe  real-time quantitative PCR  WSSV  shrimp  
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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