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AANAT基因在滩羊不同繁殖时期卵巢中的转录差异及DNA甲基化程度分析
引用本文:张辉,李晓雨,狄冉,刘玉芳,储明星.AANAT基因在滩羊不同繁殖时期卵巢中的转录差异及DNA甲基化程度分析[J].中国畜牧兽医,2021,48(1):226-234.
作者姓名:张辉  李晓雨  狄冉  刘玉芳  储明星
作者单位:1. 河北工程大学生命科学与食品工程学院, 邯郸 056021;2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 农业农村部动物遗传育种与繁殖重点实验室, 北京 100193
基金项目:国家自然科学基金(31861143012);河北省自然科学基金青年项目(C2019402261);国家肉羊产业技术体系专项(CARS-38);中国农业科学院科技创新工程(ASTIP-IAS13);农业科研杰出人才及其创新团队项目(农办人[2015]62号);国家万人计划科技创新领军人才项目(W02020274)
摘    要:试验旨在检测5-羟色胺-N-乙酰基转移酶(AANAT)基因在绵羊休情季节和繁殖季节(卵泡期和黄体期)卵巢组织中的转录差异,并分析转录差异是否由DNA甲基化修饰程度改变所导致。试验采用自然环境条件和饲养管理一致,且体重差异在0.5 kg范围内的空怀母滩羊作为试验动物,采集其休情期、卵泡期和黄体期(每个时期3只)的卵巢组织,采用SYBR染料法进行实时荧光定量PCR检测AANAT基因在滩羊不同繁殖时期卵巢组织中的转录水平。随后针对转录水平有差异的两个时期(休情期和卵泡期)的样本,利用MethPrimer 2.0在线软件预测AANAT基因启动子区和第一外显子区的CpG岛;用重亚硫酸盐测序法(BSP法)检测AANAT基因启动子区及第一外显子区的甲基化程度。试验结果显示,滩羊休情期卵巢组织中AANAT基因转录水平显著低于卵泡期的AANAT基因转录水平(P<0.05),休情期与黄体期滩羊卵巢组织中AANAT基因的转录水平差异不显著(P>0.05)。滩羊卵巢组织中AANAT基因启动子区上存在着一个长度为173 bp的CpG岛,第一外显子区存在着一个长度为118 bp的CG岛。然而,两个甲基化岛区内的单个CpG位点甲基化程度在滩羊休情期和卵泡期之间均不存在显著差异,暗示AANAT基因的表达受甲基化修饰外的因素调控。本研究结果可为进一步探讨AANAT基因在季节性发情和卵泡成熟中的功能提供参考资料。

关 键 词:滩羊  季节性发情  AANAT基因  转录  DNA甲基化  
收稿时间:2020-07-09
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