| DAB389(Gly4Ser)2αMSH重组融合蛋白的构建及表达 |
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| 引用本文： | 李泽鸿,张国利,岳玉环,朱平.DAB389(Gly4Ser)2αMSH重组融合蛋白的构建及表达[J].中国兽医学报,2007,27(4):477-480. |
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| 作者姓名： | 李泽鸿 张国利 岳玉环 朱平 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春130062;吉林农业大学生物技术学院,吉林,长春,130118
2. 军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春130062 |
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| 基金项目： | 科技部科技型中小企业技术创新项目 |
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| 摘 要： | 利用含有白喉毒素N端序列的基因作上游引物、含有αMSH全序列和（Gly4Ser）2互补序列的基因作下游引物，以pET28a／DAB389（Gly4Set）2EFG为模板，PCR扩增DAB389（Gly4Ser）2αMSH基因片段，用限制性内切酶EcoR Ⅰ和NcoⅠ酶切，并插入原核表达载体pET28a的相应位点，构建了重组表达载体pET28a／DABm（Gly4Ser）2αMSH，在大肠杆菌中表达重组融合蛋白DAB389（Gly4Ser）2αMSH，转化菌经IPTG、30C诱导5h，用SDS—PAGE和Western blot鉴定表达的重组蛋白。结果表明扩增的片段与理论值一致。重组质粒的DNA序列分析正确。SDS—PAGE表明，重组蛋白相对分子质量为45870，且表达量达菌体总蛋白量的29．2％。Western blot分析显示，重组蛋白能特异地与抗白喉抗体结合。成功构建表达了重组DABm（Gly4Ser）2αMSH的工程菌株，表达产物具有生物学活性。
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| 关 键 词： | DAB389(Gly4Ser)2αMSH 重组蛋白 构建 表达 |
| 文章编号： | 1005-4545（2007）04-0477-04 |
| 修稿时间： | 2005-09-06 |
Construction and expression of recombinant Toxin DAB389(Gly4Ser)2αMSH |
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| LI Ze-hong,ZHANG Guo-li,YUE Yu-huan,ZHU Ping.Construction and expression of recombinant Toxin DAB389(Gly4Ser)2αMSH[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2007,27(4):477-480. |
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| Authors: | LI Ze-hong ZHANG Guo-li YUE Yu-huan ZHU Ping |
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| Institution: | 1. Institute of Military Veterinary, Academy of Military Medical Sciences ,Changchun 130062, China;2. College of Biological Technology, Jilin Agriculture University, Changchun 130118, China |
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| Abstract: | |
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