| 水稻LRR型受体蛋白激酶OsRPK1胞外区酵母双杂交诱饵载体构建 |
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| 引用本文： | 朱晓南.水稻LRR型受体蛋白激酶OsRPK1胞外区酵母双杂交诱饵载体构建[J].安徽农业科学,2015(31). |
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| 作者姓名： | 朱晓南 |
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| 作者单位： | 江南大学生物工程学院,214122 |
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| 摘 要： | 目的]寻找水稻LRR型蛋白受体激酶(Leucine rich repeat receptor protein kinase) OsRPK1胞外结构域的互作蛋白.方法]以日本晴水稻为研究材料,以水稻根部cDNA为模板通过PCR扩增方法得到OsRPK1胞外结构域基因编码片段OsRPK1-OD(969 bp).将该片段插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7,构建重组诱饵载体pGBKT7-OsRPK1-OD.结果]对pGBKT7-OsRPK1-OD进行毒性检测和转录自激活鉴定,酵母生长结果发现,含有pGBKT7-OsRPK1-OD载体的Y2H Gold细胞,在SD/-Trp、SD/-Trp/X-α-gal营养缺陷型固体培养基上生长出白色菌落,在SD/-Trp/X-α-gal/AbA固体培养基上生长受到抑制;在SD/-Trp生长出含有pGBKT7-OsRPK1-OD载体的Y2H Gold酵母菌落大小与转化了空载的酵母菌落大小一致,显示插入的OsRPK1-OD对酵母生长无毒性作用.结论]OsRPK1-OD无法参与激活转录酵母中报告基因HIS3,ADE2,MEL1和AUR1-C,该片段可以作为诱饵基因筛查水稻cDNA文库,寻找与之相互作用的蛋白质.
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| 关 键 词： | 水稻受体激酶 OsRPK 酵母双杂交 诱饵载体 |
Construction on Leucine Rich Repeat Receptor Protein Kinase OsRPK1 Extracelluar Domains's Coding Gene as Yeast Two Hybrid Bait Vector of Oryza sativa L. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rice receptor protein kinase OsRPK Yeast two hybrid Bait vector |
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