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鸡MHC Ⅰ类分子克隆及其二聚体融合
引用本文:戴银,程宝艳,胡晓苗,王骏俊,陈芳芳,余为一.鸡MHC Ⅰ类分子克隆及其二聚体融合[J].中国畜牧兽医,2011,38(3).
作者姓名:戴银  程宝艳  胡晓苗  王骏俊  陈芳芳  余为一
作者单位:1. 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,安徽,合肥,230031
2. 安徽农业大学动物科技学院,安徽,合肥,230036
摘    要:为进一步研究MHCI类分子作用机制,以及为制备MHCI基因工程疫苗奠定基础,克隆鸡MHCⅠ基因,并构建MHC Ⅰβ2m-a融合基因进行原核表达.运用RT-PCR方法,克隆鸡MHC Ⅰa和β2m链基因,并通过编码连接肽(Gly4 Ser).的基因序列将两者头尾相连,构建了pET-32a-MHC Ⅰβ2m-a重组质粒,经PCR扩增、双酶切和测序鉴定后,重组质粒在E.coliBL2 Ⅰ细胞进行IPTG诱导表达融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting方法分别检测表达产物.结果表明,成功克隆了MHCⅠa和β2m链基因,长度分别为1014和300 by;构建的融合基因MHCⅠβ2m-a长度为1194 by,经原核表达,融合蛋白分子质量约为62.0 ku,能与相应的抗体结合,具有一定的免疫学活性.

关 键 词:鸡MHCⅠa链  鸡MHCⅠβ2m链  融合蛋白

Cloning and Fusion Expression of Chicken MHC Ⅰ Molecule
DAI Yin,CHENG Bao-yan,HU Xiao-miao,WANG Jun-Jun,CHEN Fang-fang,YU Wei-yi.Cloning and Fusion Expression of Chicken MHC Ⅰ Molecule[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2011,38(3).
Authors:DAI Yin  CHENG Bao-yan  HU Xiao-miao  WANG Jun-Jun  CHEN Fang-fang  YU Wei-yi
Abstract:
Keywords:
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