甘蓝锌指蛋白转录因子BoC2H2的克隆、定位与表达分析 |
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引用本文: | 罗绍兰,廉小平,蒲敏,白晓璟,王玉奎,曾静,施松梅,张贺翠,朱利泉.甘蓝锌指蛋白转录因子BoC2H2的克隆、定位与表达分析[J].作物学报,2018,44(11):1650-1660. |
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作者姓名: | 罗绍兰 廉小平 蒲敏 白晓璟 王玉奎 曾静 施松梅 张贺翠 朱利泉 |
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作者单位: | 1. 西南大学农学与生物科技学院, 重庆 400700;2. 西南大学园艺园林学院, 重庆 400700;3. 西南大学资源与环境科学学院, 重庆 400700;4. 长江师范学院生命科学与技术学院, 重庆 408100 |
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基金项目: | This study was supported by the National Natural Science Foundation of China(31572127);the Fundamental Research Fund of Southwest University(XDJK2017E073) |
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摘 要: | C2H2型锌指蛋白是植物中最重要的转录调节子之一, 主要调控植物的生长发育和胁迫应答反应。本研究通过分析自交不亲和甘蓝未授粉, 自花授粉15、30和60 min, 异花授粉15、30和60 min柱头转录组数据, 筛选到一个自花授粉诱导上调表达的C2H2型锌指蛋白基因, 命名为BoC2H2。BoC2H2开放阅读框756 bp, 编码251个氨基酸残基, 蛋白分子量为26.7 kDa, 等电点为4.62, 是一种亲水性蛋白, 不含信号肽和跨膜域, 含有C2H2型锌指蛋白家族高度保守的ZnF_C2H2结构域。BoC2H2起始密码子上游2000 bp的核苷酸序列中含有光响应、昼夜节律、茉莉酸响应、防御和应激反应等多种顺式作用元件。通过原生质体亚细胞定位和瞬时浸染烟草, 发现BoC2H2蛋白在细胞核和细胞质中表达。BoC2H2在下胚轴、叶片和花中均有表达, 柱头中的表达量随发育时间而变化, 开花当天后表达量降低。荧光定量PCR结果显示, BoC2H2在自花授粉和异花授粉0~60 min的表达量变化趋势与转录组分析结果基本一致。综上所述, 甘蓝BoC2H2属于C2H2型锌指蛋白家族, 可能参与了柱头响应花粉刺激的分子过程, 这有利于揭示BoC2H2在甘蓝自交不亲和过程中的作用机制, 为研究C2H2型转录因子在甘蓝自交不亲和过程中的调控机制提供依据。
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关 键 词: | 甘蓝 C2H2锌指蛋白 BoC2H2基因 自交不亲和 定位 表达分析 |
收稿时间: | 2018-02-12 |
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