| 番鸭源禽1型副黏病毒HN基因主要抗原结构域和V基因融合表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 傅光华,程龙飞,施少华,陈红梅,彭春香,黄瑜.番鸭源禽1型副黏病毒HN基因主要抗原结构域和V基因融合表达载体的构建[J].吉林农业大学学报,2009,31(1). |
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| 作者姓名： | 傅光华 程龙飞 施少华 陈红梅 彭春香 黄瑜 |
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| 作者单位： | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福州,350013 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973计划)，国家自然科学基金，福建省财政专项--福建省农科院科技创新团队建设基金 |
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| 摘 要： | 为构建番鸭源禽1型副黏病毒HN主要抗原结构域(HNd)和V基因融合表达载体,经PCR及融合PCR分别从重组质粒pMDHN和pMDP中扩增HN基因主要结构域和V基因cDNA.将HNd经KpnⅠ和BamHⅠ双酶切、V基因用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,分别定向插入真核载体pcDNA3的多克隆位点相应的酶切位点中,对2个单表达质粒pcDNAHNd和pcDNAV进行酶切和测序鉴定.利用融合PCR技术扩增出HNd-V基因,定向克隆至pcDNA3的EcoRⅠ和XhoⅠ酶切酶切位点之间,转化感受态细胞后,经PCR反应初筛后,对阳性克隆进行酶切分析及测序鉴定.对单表达重组质粒进行酶切分析及测序鉴定,结果表明:HNd和V基因已被正确定向克隆至真核表达载体peDNA3,成功构建了2个基因的单表达质粒pcDNAHNd和pcDNAV;对融合重组质粒酶切分析和测序鉴定表明,HNd-V融合基因正确克隆进真核表达质粒pcDNA3中,成功构建了融合表达载体pcDNAHNd-V.
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| 关 键 词： | 番鸭源 禽1型副黏病毒 HN基因主要结构域 V基因 融合表达载体 |
Construction of Fusion Gene Vector with the Major Antigenic Domains of Muscovy Duck Original Avian Paramyxovirus Type 1 HN Gene and the Whole V Gene |
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| FU Guang-hua,CHENG Long-fei,SHI Shao-hua,CHEN Hong-mei,PENG Chun-xiang,HUANG Yu.Construction of Fusion Gene Vector with the Major Antigenic Domains of Muscovy Duck Original Avian Paramyxovirus Type 1 HN Gene and the Whole V Gene[J].Journal of Jilin Agricultural University,2009,31(1). |
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| Authors: | FU Guang-hua CHENG Long-fei SHI Shao-hua CHEN Hong-mei PENG Chun-xiang HUANG Yu |
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| Institution: | Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine;Fujian Academy of Agricultural Sciences;Fuzhou 350013;China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | muscovy duck original avian paramyxovirus type 1 major antigenic domains of HN gene V gene fusion gene expression vector |
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