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新城疫病毒HN蛋白球状头部在T4噬菌体衣壳表面的展示
引用本文:刘铀,毕英佐,曹永长,马静云,肖俊芳.新城疫病毒HN蛋白球状头部在T4噬菌体衣壳表面的展示[J].中国兽医学报,2005,25(4):346-349.
作者姓名:刘铀  毕英佐  曹永长  马静云  肖俊芳
作者单位:华南农业大学动物科学学院,广东,广州,510640
基金项目:国家“863”计划资助项目(2002AA245051)
摘    要:用RT-PCR扩增新城疫病毒(NDV)hn基因,得到大小约1700bp的片段,将其克隆至pGEM-T easy载体并测定其核苷酸序列。根据测序结果,另设计1对引物带有EcoR I限制位点,用PCR扩增基因主要功能区即编码HN蛋白球状头部的hngd片段,将其分别克隆至pSOC和pR质粒soc基因3′端,重组质粒pSOC-HNGD转化E.coli BL-21(DE3)感受态细胞,以终浓度1mmol/L的1PTG诱导表达,在SDS-PAGE凝胶上检测到相对分子质量大小约67000的目的蛋白条带。随后将重组质粒pR-HNGD转化T4宿主菌E2感受态细胞.阳性克隆用溶菌酶缺陷的T4-Z1感染,用不加溶菌酶的SC平板筛选阳性克隆。经PCR鉴定,hngd片段已整合在T4-Z1的基因组中。纯化后的重组噬菌体T4-Z1-HNGD用SDS-PAGE和Western-blot可检测到67000的特异条带。结果表明,HNGD蛋白成功展示在T4噬菌体衣壳表面,且与NDV抗血清具有良好的反应性。

关 键 词:新城疫病毒  T4噬菌体  HN蛋白  展示
文章编号:1005-4545(2005)04-0346-04
修稿时间:2004年4月7日

Display of the Globular domain of HN Protein of Newcastle Disease Virus on the Bacteriophage T4 Capsid Surface
LIU You,BI Ying-zuo,CAO Yong-chang,MA Jing-Yun,XIAO Jun-fang.Display of the Globular domain of HN Protein of Newcastle Disease Virus on the Bacteriophage T4 Capsid Surface[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2005,25(4):346-349.
Authors:LIU You  BI Ying-zuo  CAO Yong-chang  MA Jing-Yun  XIAO Jun-fang
Abstract:
Keywords:Newcastle disease virus  T4 bacteriophage  HN protein  display
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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