| 陆地棉纤维中 GhGMPase2基因克隆、序列分析及原核表达 |
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| 引用本文： | 赛富涛,禄亚洲,王 斐,钱雯婕,李鸿彬.陆地棉纤维中 GhGMPase2基因克隆、序列分析及原核表达[J].西北农业学报,2013,22(12):49-55. |
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| 作者姓名： | 赛富涛 禄亚洲 王 斐 钱雯婕 李鸿彬 |
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| 作者单位： | （1.石河子大学 生命科学学院，新疆石河子 832003; 2. 石河子大学 农业生物技术重点实验室，新疆石河子 832003） |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31260039）；兵团种质资源创新专项（2012BB050）；农业部转基因专项（2009ZX08005-027B）。 |
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| 摘 要： | 从陆地棉纤维中克隆GDP-甘露糖焦磷酸化酶（ GhGMPase2）基因，并进行序列分析及原核表达。利用RT-PCR技术进行基因克隆，构建原核表达载体pET28a- GhGMPase2并转化大肠杆菌BL21（DE3）进行蛋白体外诱导表达，通过SDS-PAGE检测目的蛋白的表达。研究结果表明，从陆地棉花纤维中克隆得到棉 GhGMPase2基因，该基因的开放读码框为1 086 bp，编码包含362个氨基酸的蛋白质，分子质量约为40 ku。序列分析结果表明，GhGMPase2蛋白具有较高的保守性，具有典型的糖酰基转移酶转移酶A家族（GT-A）结构域和左手平行的β-的螺旋（LbetaH或LBH）域，它们分别属于糖酰基转移酶家族2（GT-2）超家族和LBH超家族。进化树分析的结果显示，棉花 GhGMPase2与烟草NtGMPase在进化上亲缘关系较近。经过原核表达载体pET28a- GhGMPase2的诱导表达和SDS-PAGE分析显示，获得分子质量约为40 ku的重组GhGMPase2蛋白。 GMPase2基因的克隆、序列分析及原核表达为进一步研究其参与棉花纤维发育过程中的重要功能奠定基础。
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| 关 键 词： | 棉花纤维 GDP-甘露糖焦磷酸化酶基因 克隆 原核表达 |
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