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融合6个组氨酸的人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子在家蚕幼虫中的表达
引用本文:朱立成,陈健,林蓉,金勇丰,张耀洲.融合6个组氨酸的人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子在家蚕幼虫中的表达[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2005,31(5):613-616.
作者姓名:朱立成  陈健  林蓉  金勇丰  张耀洲
作者单位:浙江大学生物化学研究所,浙江大学生物化学研究所,浙江大学动物科学学院蚕蜂科技系,浙江大学生物化学研究所,浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所 浙江杭州310029 井冈山大学生命科学学院,江西吉安343009,浙江杭州310029 浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所,浙江杭州310018,浙江杭州310029,浙江杭州310029,浙江杭州310018
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:将融合6个组氨酸(6×his)序列的hGM-CSF基因插入杆状病毒转移载体pBacPAK8中得到杆状病毒重组转移载体pBacPAKHis-GM-CSF,pBacPAKHis-GM-CSF DNA与线性化病毒BmBacPAK6 DNA共转染BmN细胞,获得了表达rhGM-CSF融合蛋白的重组病毒vBacPAKHis-GMCSF.用重组病毒感染家蚕五龄起蚕,分别在24、48、72、96、120 h和144 h剪腹足取蚕血淋巴,ELISA法测得rhGM-CSF融合蛋白在120 h的蚕血淋巴中表达量最高,约为15μg/mL蚕血淋巴.融合蛋白通过Poly-His Protein Purification Kit纯化.SDS-PAGE和Western blotting分析表明,表达产物是3种糖基化程度不同的,分子量分别约为18、20、31 kD的蛋白质.

关 键 词:hGM-CSF  家蚕杆状病毒表达系统  融合表达
文章编号:1008-9209(2005)05-0613-04
修稿时间:2004年9月24日

Expression of 6 × his-hGM-CSF fusion gene in larvae of silkworm ( Bombyx nori ) using recombinant baculovirus
ZHU Li-cheng.Expression of 6 × his-hGM-CSF fusion gene in larvae of silkworm ( Bombyx nori ) using recombinant baculovirus[J].Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences),2005,31(5):613-616.
Authors:ZHU Li-cheng
Institution:ZHU Li-cheng~
Abstract:
Keywords:hGM-CSF
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