| 核基质附着区(MAR)调控的人胰岛素样生长因子(hIGF-1)转基因兔的制备 |
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| 引用本文： | 葛宝生,朱裕鼎,陈永福,沈孝宙,安民.核基质附着区(MAR)调控的人胰岛素样生长因子(hIGF-1)转基因兔的制备[J].中国兽医学报,1997(6). |
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| 作者姓名： | 葛宝生 朱裕鼎 陈永福 沈孝宙 安民 |
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| 作者单位： | 中国农业大学动物科技学院，解放军农牧大学畜牧水产系，中国农业科学院畜牧研究所，中国科学院动物研究所 |
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| 基金项目： | 国家“八六三”生物技术计划资助 |
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| 摘 要： | 用ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄⅢ双酶解含鸡α－珠蛋白基因５′端核基质附着区（ＭＡＲ）、小鼠金属硫蛋白基因启动子（ＭＴ－１）和人胰岛素样生长因子－１（ｈＩＧＦ－１）基因的ｐＭＴＳＭＣＡＧ质粒，０．６％琼脂糖凝胶电泳，玻璃乳回收纯化ＭＡＲ／ＭＴ／ｈＩＧＦ－１片段（３．９ｋｂ），用该片段制备转基因兔。利用水平显微注射系统注射１－细胞兔胚胎４６８枚，移植到３６只受体兔，有８只妊娠，共产下１９只活仔兔。采仔兔耳样提取基因组ＤＮＡ，应用ＰＣＲ技术分析其外源基因整合情况，获得８只阳性兔（显示出约６００ｂｐ外源ＤＮＡ条带）。再对８只阳性兔的ＰＣＲ产物进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，得到５只整合有ＭＡＲ／ＭＴ／ｈＩＧＦ－１外源基因的转基因兔，转基因整合率为２６．３％（５／１９）。用１只阳性转基因公兔（５０２号）繁殖了６窝，共获得４２只仔兔。采仔兔耳样提取基因组ＤＮＡ后，如上用ＰＣＲ分析和做Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，Ｆ１代中有５只整合有ＭＡＲ／ＭＴ／ｈＩＧＦ－１融合基因。
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| 关 键 词： | 核基质附着区 人胰岛素样生长因子 转基因兔 |
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