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齐口裂腹鱼HMGB1基因克隆及其对嗜水气单胞菌胁迫的响应
引用本文:王虹,彭爽,刘佳喜,陈德芳,王艳,耿毅,汪开毓,李志琼,黄小丽,欧阳萍.齐口裂腹鱼HMGB1基因克隆及其对嗜水气单胞菌胁迫的响应[J].水产学报,2018,42(12):1957-1966.
作者姓名:王虹  彭爽  刘佳喜  陈德芳  王艳  耿毅  汪开毓  李志琼  黄小丽  欧阳萍
作者单位:四川农业大学动物科技学院, 四川 成都 611130,四川农业大学动物科技学院, 四川 成都 611130,四川农业大学动物科技学院, 四川 成都 611130,四川农业大学动物科技学院, 四川 成都 611130,四川农业大学动物科技学院, 四川 成都 611130,四川农业大学鱼病研究中心, 四川 成都 611130,四川农业大学鱼病研究中心, 四川 成都 611130,四川农业大学动物科技学院, 四川 成都 611130,四川农业大学动物科技学院, 四川 成都 611130,四川农业大学鱼病研究中心, 四川 成都 611130
基金项目:国家自然科学基金(31602148);四川农业大学双支计划
摘    要:为了解齐口裂腹鱼高迁移率蛋白B1(Schizothorax prenanti high mobility group box 1,SpHMGB1)的序列特征及其与嗜水气单胞菌胁迫的相关性,实验根据齐口裂腹鱼脾脏TSA库中获得的序列设计引物,采用克隆技术克隆SpHMGB1的核心序列并进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测嗜水气单胞菌在体和离体胁迫后组织和巨噬细胞中SpHMGB1的响应情况。序列分析结果显示,SpHMGB1开放阅读框长为615 bp,编码204个氨基酸,理论分子量为23.5 ku,等电点为6.79,包含2个基本的HMG盒:A盒和B盒,以及一个酸性尾巴。SpHMGB1二级结构主要由47.06%的α-螺旋和50%的无规则卷曲构成。系统进化树分析显示,SpHMGB1与鱼类HMGB1聚为一支,与斑马鱼和鲫的亲缘关系最近,氨基酸一致性分别为90.7%和90.4%。qPCR检测结果显示,嗜水气单胞菌感染后SpHMGB1具有不同的时空表达趋势,其中血液在72 h表达量最高,肾脏在6 h表达量最高,脾脏在120 h表达量最高;热灭活嗜水气单胞菌刺激巨噬细胞后,SpHMGB1的表达量在0.5~24 h下调,24 h表达量最低,细胞因子IL-1βTNF-α表达量均有上调趋势。qPCR检测结果提示,SpHMGB1可能参与齐口裂腹鱼细菌感染后的免疫响应。本实验可为进一步研究SpHMGB1在齐口裂腹鱼细菌性疾病中的免疫调节机制提供参考。

关 键 词:齐口裂腹鱼  嗜水气单胞菌  高迁移率蛋白B1  免疫响应
收稿时间:2018/4/11 0:00:00
修稿时间:2018/6/16 0:00:00

Cloning of HMGB1 gene from Schizothorax prenanti and its response to Aeromonas hydrophila stress
WANG Hong,PENG Shuang,LIU Jiaxi,CHEN Defang,WANG Yan,GENG Yi,WANG Kaiyu,LI Zhiqiong,HUANG Xiaoli and OUYANG Ping.Cloning of HMGB1 gene from Schizothorax prenanti and its response to Aeromonas hydrophila stress[J].Journal of Fisheries of China,2018,42(12):1957-1966.
Authors:WANG Hong  PENG Shuang  LIU Jiaxi  CHEN Defang  WANG Yan  GENG Yi  WANG Kaiyu  LI Zhiqiong  HUANG Xiaoli and OUYANG Ping
Institution:College of Animal Science & Technology, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China,College of Animal Science & Technology, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China,College of Animal Science & Technology, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China,College of Animal Science & Technology, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China,College of Animal Science & Technology, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China,Fish Disease Research Center, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China,Fish Disease Research Center, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China,College of Animal Science & Technology, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China,College of Animal Science & Technology, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China and Fish Disease Research Center, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China
Abstract:
Keywords:Schizothorax prenanti  Aeromonas hydrophila  high mobility group box 1  immune response
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