| 利用桥梁载体策略构建水稻条斑病菌T3SS基因诱导表达检测体系 |
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| 引用本文： | 吾尼尔别克·美丽,杨小菲,张翠萍,杨瑞环,李生樟,李逸朗,陈功友,陈晓斌,邹丽芳.利用桥梁载体策略构建水稻条斑病菌T3SS基因诱导表达检测体系[J].植物病理学报,2019,49(6):846-856. |
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| 作者姓名： | 吾尼尔别克·美丽 杨小菲 张翠萍 杨瑞环 李生樟 李逸朗 陈功友 陈晓斌 邹丽芳 |
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| 作者单位： | 上海交通大学农业与生物学院,上海 200240 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划资助(2017YFD0200400);国家自然科学基金(31470235; 31772122) |
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| 摘 要： | 水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzicola, Xoc)侵染水稻,引起细菌性条斑病(bacterial leaf streak, BLS)。Xoc主要依靠hrp基因簇(T3SS基因)编码的III型分泌系统(type III secretion system, T3SS)将效应蛋白注入水稻细胞中,激发寄主水稻的感(抗)病性。为了准确在Xoc中进行T3SS基因表达调控的分析,本研究设计出桥梁载体策略,将目标基因的启动子或者功能片段构建在高拷贝的桥梁载体,获得融合表达元件,通过亚克隆的方式将融合元件转入骨架载体上,获得用于转录表达和蛋白表达分析的载体。为了验证该策略的可行性,选取hrpG、hrpX和hrcC基因构建了相应的启动子探针载体和蛋白表达载体,将这些载体导入毒性调控子基因trh、lrpX和zur的突变体中,GUS活性测定、荧光定量PCR以及蛋白免疫杂交结果显示:在trh、lrpX和zur的突变体中,hrpG、hrpX和hrcC的转录表达水平、mRNA水平和蛋白表达水平呈现一致。这表明这套桥梁载体策略能够有效应用于T3SS基因转录表达和蛋白表达的分析。综上所述,运用桥梁载体能够克服低拷贝载体DNA遗传操作效率低的缺陷,这一策略也适用于毒性相关基因调控机理的研究,这将为Xoc-水稻互作研究提供高效的工作系统。
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| 关 键 词： | 水稻条斑病菌 T3SS基因 启动子探针载体 蛋白表达载体 |
| 收稿时间： | 2018-11-23 |
Establishment of the inducing expression detection system of Xanthomonas oryzae pv. oryzicola T3SS genes using bridge vector strategy |
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| WUNIERBIEKE Mei-li,YANG Xiao-fei,ZHANG Cui-ping,YANG Rui-huan,LI Sheng-zhang,LI Yi-lang,CHEN Gong-you,CHEN Xiao-bin,ZOU Li-fang.Establishment of the inducing expression detection system of Xanthomonas oryzae pv. oryzicola T3SS genes using bridge vector strategy[J].Acta Phytopathologica Sinica,2019,49(6):846-856. |
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| Authors: | WUNIERBIEKE Mei-li YANG Xiao-fei ZHANG Cui-ping YANG Rui-huan LI Sheng-zhang LI Yi-lang CHEN Gong-you CHEN Xiao-bin ZOU Li-fang |
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| Institution: | School of Agriculture and Biology, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Xanthomonas oryzae pv oryzicola T3SS genes promoter probe vector protein expression vector |
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