| 细胞因子IL-17作为牛结核病诊断标志物的研究及实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 高新桃,贾红,侯绍华,郭晓宇,袁维峰,姜一曈,朱鸿飞,鑫婷.细胞因子IL-17作为牛结核病诊断标志物的研究及实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].中国畜牧兽医,2018,45(6):1447-1453. |
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| 作者姓名： | 高新桃 贾红 侯绍华 郭晓宇 袁维峰 姜一曈 朱鸿飞 鑫婷 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193 |
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| 基金项目： | 北京市自然科学基金（6164039）；国家重点研发计划（2016YFD0500902）；中国农业科学院科技创新工程（ASTIO-IAS-11） |
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| 摘 要： | 试验旨在评价细胞因子IL-6和IL-17 mRNA转录水平与牛分枝杆菌感染之间的关系，及其在牛结核病诊断中的应用潜力。通过皮内变态反应试验和IFN-γ释放试验临床筛选结核病阳性牛和结核病阴性牛，采集试验动物抗凝全血，分离、收集外周血淋巴细胞，分别用牛结核菌素（PPD-B）、禽结核菌素（PPD-A）、重组蛋白CFP-10-ESAT-6（CE）、pET-32a载体标签蛋白（PET）或PBS 37℃培养6 h，用实时荧光定量PCR检测细胞因子IL-6、IL-17和IFN-γ的mRNA相对转录水平。结果显示，PET和空白对照PBS类似，不能刺激细胞因子mRNA转录水平的提高，表明CE中包含的PET对试验的影响可忽略不计；牛外周血淋巴细胞经PPD-B、PPD-A或CE刺激后，结核病阳性牛样品中IL-17和IFN-γ的mRNA转录水平均显著高于结核病阴性牛（P<0.05），其中PPD-B刺激效果强于CE和PPD-A，而CE刺激的特异性更好；选取CE作为最佳刺激源，结果显示，IL-17和IFN-γ的mRNA转录水平之间相关性良好（spearman r=0.79），并初步建立了基于IL-17和IFN-γ转录水平的实时荧光定量PCR检测方法；以此方法对14头结核病阳性牛进行临床检验，IL-17实时荧光定量PCR法的阳性样本检出率为85.7%，高于IFN-γ（71.4%）。本研究结果初步表明，牛分枝杆菌特异性抗原（PPD-B、CE）诱导的IL-17 mRNA转录水平与牛结核病相关，以CE为刺激源建立的IL-17实时荧光定量PCR检测方法具有用于牛结核病诊断的潜力。
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| 关 键 词： | 牛结核病 诊断 IL-17 IFN-&gamma 实时荧光定量PCR |
| 收稿时间： | 2017-12-05 |
Research on the Potential of IL-17 as a Biomarker of Bovine Tuberculosis and Establishment of Its Real-time PCR Assay |
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| GAO Xintao,JIA Hong,HOU Shaohua,GUO Xiaoyu,YUAN Weifeng,JIANG Yitong,ZHU Hongfei,XIN Ting.Research on the Potential of IL-17 as a Biomarker of Bovine Tuberculosis and Establishment of Its Real-time PCR Assay[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2018,45(6):1447-1453. |
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| Authors: | GAO Xintao JIA Hong HOU Shaohua GUO Xiaoyu YUAN Weifeng JIANG Yitong ZHU Hongfei XIN Ting |
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| Institution: | Institute of Animal Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bovine tuberculosis diagnosis IL-17 IFN-γ Real-time PCR |
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