| 棘豆链格孢P5CR基因的克隆及表达分析 |
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| 引用本文： | 白璐,卢萍,王钰,珠丽,袁博,高峰,杜玲.棘豆链格孢P5CR基因的克隆及表达分析[J].中国兽医杂志,2023(4):33-40. |
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| 作者姓名： | 白璐 卢萍 王钰 珠丽 袁博 高峰 杜玲 |
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| 作者单位： | 内蒙古师范大学生命科学与技术学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31960130,31460235,30860049)；;内蒙古自然科学基金项目(2022MS03014)； |
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| 摘 要： | 在一些可合成苦马豆素(SW)的真菌中，吡咯啉-5-羧酸还原酶(P5CR)可催化哌啶酸(PA)的生物合成。为了研究P5CR基因对真菌苦马豆素合成的影响，本试验克隆了小花棘豆内生真菌棘豆链格孢(Alternaria oxytropis) OW7.8的P5CR基因，并对其进行生物信息学预测；利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析不同培养时间(23 d、26 d、29 d、32 d)下处理组培养基添加L-哌啶酸(L-PA)]和对照组菌丝体中P5CR基因表达水平；利用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)技术检测菌丝体中苦马豆素水平。预测结果显示，P5CR基因序列从ATG到TAG为1 179 bp,开放阅读框(ORF)长954 bp,有1个内含子，编码317个氨基酸，分子量为33 297.32 D,等电点为6.14,是稳定疏水性蛋白，无信号肽，可能有跨膜结构域，二级结构主要以随机卷曲为主。qRT-PCR结果显示，随培养时间延长，处理组P5CR基因表达水平先下降后上升，对照组P5CR基因表达水平逐渐下降。HPLC-MS结果显示，处理组菌丝体中苦马豆素水平均高于对照组(P<0.0...
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| 关 键 词： | 内生真菌 苦马豆素 吡咯啉-5-羧酸还原酶 生物信息学 高效液相色谱-质谱联用 |
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