| 二重荧光RT-LAMP鉴别检测禽呼肠孤病毒和鸡滑液囊支原体 |
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| 引用本文： | 曾婷婷,谢芝勋,谢丽基,王盛,谢志勤,黄娇玲,万丽军,任红玉,张艳芳,张民秀,范晴,邓显文.二重荧光RT-LAMP鉴别检测禽呼肠孤病毒和鸡滑液囊支原体[J].畜牧与兽医,2023(9):66-75. |
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| 作者姓名： | 曾婷婷 谢芝勋 谢丽基 王盛 谢志勤 黄娇玲 万丽军 任红玉 张艳芳 张民秀 范晴 邓显文 |
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| 作者单位： | 广西壮族自治区兽医研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31660715)； |
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| 摘 要： | 本研究旨在建立一套通过添加荧光探针FD,反应后可使用成像仪直接观测结果的鉴别检测禽呼肠孤病毒(ARV)和鸡滑液囊支原体(MS)的二重荧光RT-LAMP检测方法。根据ARV和MS的保守基因片段，设计了2套LAMP引物，并各添加1条FD荧光探针，2条FD探针分别标记CY5和6-FAM荧光基团。结果：ARV阳性对照在成像仪下发出红色荧光，MS阳性对照发出绿色荧光，双重模板经过图像融合后为黄色荧光；特异性结果显示，该二重荧光RT-LAMP检测方法仅能扩增ARV和MS两种病原，对其他常见病原如鸡毒支原体(MG)、禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)等无扩增反应；敏感性结果显示，该二重荧光RT-LAMP检测方法对ARV和MS的最低检测量分别为1.7×102 copies和1.9×102 copies;使用该方法检测40份临床样品，检出率与本实验室前期建立的二重荧光RT-PCR检测结果相同。综上，该二重荧光RT-LAMP检测方法可特异、敏感地鉴别检测ARV和MS,通过添加FD荧光探针和成像仪观测结果，为不同条件的实验室提供了新的检测手段。
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| 关 键 词： | FD荧光探针 二重荧光RT-LAMP 禽呼肠孤病毒 鸡滑液囊支原体 |
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