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绵羊肺炎支原体P110/LppT黏附素家族保守区的原核表达和免疫原性分析
引用本文:徐春光,郝永清,刘波,高明华,李艳.绵羊肺炎支原体P110/LppT黏附素家族保守区的原核表达和免疫原性分析[J].中国兽医杂志,2023(6):29-37.
作者姓名:徐春光  郝永清  刘波  高明华  李艳
作者单位:1. 呼伦贝尔学院农学院;2. 内蒙古农业大学兽医学院
基金项目:内蒙古自然科学基金面上项目(2016MS0328);
摘    要:绵羊肺炎支原体(Mo) NM2010株的P120蛋白与猪肺炎支原体(Mhp)的黏附素P110高度同源,同属于P110/LppT黏附素N端结构域家族。为了筛选用于研制广谱绵羊支原体肺炎疫苗的保护性抗原,本试验利用生物信息学方法对Mo NM2010株P120蛋白的保守区段、结构、B细胞抗原表位进行预测分析,并对P120基因的N端和C端2个保守区基因片段进行克隆、表达、可溶性分析和抗原特性分析;2个表达产物分别对兔进行免疫试验,用ELISA方法检测免疫兔血清抗体效价和IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ细胞因子浓度。结果显示,P120蛋白N端有信号肽和1个跨膜螺旋,亚细胞定位在外膜,可能是一种外膜蛋白,P120蛋白N端和C端2个保守区段均有较多B细胞线性抗原表位,具有较好的抗原性;经序列测定证实,合成的P120-N和P120-C 2个基因片段的基因序列完全正确,长度分别为1 509 bp和741 bp,表达的重组蛋白分子质量分别为58.1 kDa和29.5 kDa; P120蛋白N端以可溶和包涵体2种形式存在,C端以包涵体形式存在,均具有良好的抗原性;新西兰大白兔经4次免疫后,重组蛋白...

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