| 塞内卡病毒多克隆抗体的制备及其在免疫组织化学中的初步应用 |
| |
| 引用本文： | 杨珍,江之瑶,夏玉洁,马凤龙,李心清,郭亚飞,杨洁,李明义.塞内卡病毒多克隆抗体的制备及其在免疫组织化学中的初步应用[J].中国兽医杂志,2023(8):72-76. |
| |
| 作者姓名： | 杨珍 江之瑶 夏玉洁 马凤龙 李心清 郭亚飞 杨洁 李明义 |
| |
| 作者单位： | 2. 甘肃农业大学动物医学院;3. Blinn College;4. 青岛市黄岛区卫生健康局 |
| |
| 摘 要： | 为了制备纯度高、特异性强的塞内卡病毒(SVA)多克隆抗体并研究其在免疫组织化学(IHC)中的应用，本试验用甲醛溶液灭活SVA,将其与矿物油佐剂充分混合乳化后，接种兔制备多克隆抗体并测定中和抗体效价，经Protein A亲和层析介质纯化，用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定抗体纯度，用斑点杂交法(Dot blot)鉴定抗体特异性；以该抗体作为一抗，应用IHC技术检测SVA感染猪的蹄部组织切片中抗原的表达情况。结果显示，制备的SVA多克隆抗体中和抗体效价为1∶1 024,纯化后的抗体经SDS-PAGE鉴定仅有分子量约55 kDa和25 kDa两条目的蛋白条带；Dot blot结果显示，该抗体特异性强，最低检测浓度为0.15μg/mL;IHC结果显示，该抗体在1∶500稀释时能够检测到组织切片中抗原的表达。结果表明，本试验制备的SVA多克隆抗体符合IHC技术要求，可为下一步SVA致病机理研究提供重要的试验材料。
|
| 关 键 词： | 塞内卡病毒 多克隆抗体 鉴定 免疫组织化学 |
|
|
