| 马疱疹病毒8型TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 纪言霏,齐来勇,张健鹏,许丹丹,张敬文,赵霞,刘文强.马疱疹病毒8型TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].中国兽医杂志,2023(8):24-28. |
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| 作者姓名： | 纪言霏 齐来勇 张健鹏 许丹丹 张敬文 赵霞 刘文强 |
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| 作者单位： | 1. 聊城大学农学与农业工程学院;2. 聊城市东昌府区农业农村局 |
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| 摘 要： | 为了建立一种能够快速检测马疱疹病毒8型(EHV-8)的方法，本试验以EHV-8的全基因组序列为模板，针对糖蛋白B(gB)基因的保守序列，进行对比分析，设计EHV-8的特异性引物和探针，优化反应条件，建立EHV-8 TaqMan实时荧光定量PCR检测方法，并对该方法的敏感性、特异性和重复性进行验证，使用该方法进行临床样本检测。结果显示，建立的EHV-8 TaqMan实时荧光定量PCR检测方法对EHV-8 DNA模板的最低检测限为1.1×102 copies/μL,敏感性高；EHV-8与EHV-1、EHV-4、马流产沙门氏菌和肠产毒性大肠杆菌均无交叉反应，特异性强；批内重复性试验和批间重复性试验均表明该方法重复性好。对132份临床样本的检测结果显示，阳性检出率为10.61%,基因测序正确。由此可见，本试验建立的EHV-8 TaqMan实时荧光定量PCR检测方法能够满足EHV-8的检测需求，且该方法敏感性高、特异性强、重复性好，为EHV-8的进一步研究提供了有效的辅助检测手段。
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| 关 键 词： | 驴 马疱疹病毒8型 糖蛋白B(gB)基因 实时荧光定量PCR TaqMan探针 |
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