| 广谱性识别H7亚型禽流感病毒HA蛋白的单克隆抗体制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 王勋,李鸽,李青梅,吕镕州,孟泽锟,柴书军,杨继飞,郭军庆,张改平.广谱性识别H7亚型禽流感病毒HA蛋白的单克隆抗体制备与鉴定[J].河南农业科学,2022(11):119-126. |
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| 作者姓名： | 王勋 李鸽 李青梅 吕镕州 孟泽锟 柴书军 杨继飞 郭军庆 张改平 |
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| 作者单位： | 1. 河南农业大学动物医学院;2. 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;3. 西北农林科技大学动物医学院;4. 扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 |
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| 基金项目： | 河南省科技攻关项目（212102110091）； |
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| 摘 要： | H7N9亚型禽流感病毒（AIV）的快速进化与变异使得其逃脱现有抗体的识别，为提供H7亚型AIV鉴别诊断所需重要材料，制备可识别H7亚型AIV HA蛋白的单克隆抗体（mAb）。采用差速离心法纯化的H7N9亚型AIV(A/Chicken/Guangdong/SW154/2015)免疫BALB/c小鼠，利用杂交瘤技术制备杂交瘤细胞，采用血凝抑制（HI）试验、免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）和间接ELISA检测方法筛选阳性杂交瘤细胞株。结果显示，获得5株稳定分泌抗H7N9 AIV HA蛋白mAb的杂交瘤细胞，腹水ELISA效价均为1∶1 000 000；其中，4株mAb的重链为IgG1,1株mAb的重链为IgG2b，轻链均为κ链。特异性测定结果显示，5株mAb仅与H7亚型AIV反应，不与其他亚型流感病毒发生反应；广谱性测定结果显示，5株mAb均可与不同年份分离出的H7亚型AIV发生反应；HI结果显示，腹水针对H7-Re3抗原株的HI效价为7 log2～12 log2;MDCK细胞微量中和试验结果显示，5株mAb均具有中和活性；Dot blot检测结果显示，5株mAb均可识别H7-Re2抗...
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 H7N9 单克隆抗体 广谱性 中和活性 |
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