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| 实时荧光定量RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒方法的建立及应用 | |
| 作者单位： | ;1.海南职业技术学院生物工程学院;2.海南师范大学生命科学学院 |
| 摘 要： | 本研究将猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N基因部分片段克隆并连接到pGEM-T Easy载体上,得到重组质粒,以此为标准模板进行SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR扩增并制作标准曲线,建立TGEV的荧光定量RT-PCR检测方法。该方法检测灵敏度可达10拷贝/μL,具有良好的特异性和重复性;对20份临床疑似病料进行检测,发现14份为荧光定量RT-PCR阳性,而常规RT-PCR只能检测出10份。结果表明,建立的实时荧光定量RT-PCR方法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于临床TGEV感染的早期诊断以及分子流行病学调查。 |
| 关 键 词： | 猪传染性胃肠炎病毒 实时荧光定量RT-PCR SYBR GreenⅠ |
Development of real-time RT-PCR for detecting transmissible gastroenteritis virus and its preliminary application |
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