| 摘 要： | 为建立快速检测副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)毒力相关三聚自转运蛋白(Trimeric autotransporters,Vta A)的多重PCR方法,根据HPS Vta A Vta A1和Vta A3基因为模板,设计合成了2对特异性引物,进行多重PCR扩增及反应条件的优化,并对多重PCR扩增的敏感性和特异性进行了分析.结果表明:所建立的多重PCR检测方法对HPS Vta A1和Vta A3基因分别能扩增出406和291 bp的目的条带,最小检测限为3.4×107cfu/m L;此多重PCR方法只能检出HPS Vta A1和Vta A3基因400和300 bp大小的目的条带,而不能检出胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae)、猪霍乱沙门氏菌(Salmonella suipestifer)、大肠埃希氏杆菌(Escherichia coli)、支气管败血波氏杆菌(Brodetella bronchiseptica)和猪链球菌(Streptococcus suis).由此证明,所建立的多重PCR方法操作简单、快速、特异性强和敏感性高,能够实现对HPS的快速诊断与检测.
|
