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猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C位点的克隆与表达及间接ELISA方法的建立
作者单位:;1.四川省遂宁市畜牧食品局;2.四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室/动物疫病与人类健康四川省重点实验室;3.四川省遂宁市船山区畜牧食品局
摘    要:针对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因B、C抗原位点编码基因片段(SBC,下同)设计合成1对引物,用PCR方法扩增SBC基因,将该基因片段定向插入到原核表达载体p ET-32a(+)中,构建原核表达载体p ET-32a-SBC。阳性质粒转化宿主菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下表达大小约38 k D的蛋白,重组蛋白以包涵体的形式存在。Western blot分析表明,表达产物具有良好的免疫学活性。以纯化的表达产物作为诊断抗原建立了检测TGEV抗体的间接ELISA(TGEV SBC-ELISA)方法。表明建立的间接ELISA方法特异性和重复性良好,敏感性比血清中和试验高,可用于TGEV的检疫和流行病学调查。

关 键 词:猪传染性胃肠炎病毒  克隆与表达  ELISA  诊断

Cloning and Expression of the SBC Gene of Transmissible gastroenteritis virus and Development of an Indirect TGEV SBC-ELISA
Abstract:
Keywords:
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