| 利用正交设计优化黄瓜的SSR-PCR反应体系 |
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| 引用本文： | 李亚利,陈书霞,孟焕文,程智慧,柴丹丹.利用正交设计优化黄瓜的SSR-PCR反应体系[J].西北农业学报,2008,17(3):280-284. |
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| 作者姓名： | 李亚利 陈书霞 孟焕文 程智慧 柴丹丹 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 陕西省西安市科技攻关项目
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西北农林科技大学校科研和教改项目
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国家科技支撑计划 |
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| 摘 要： | 以白皮黄瓜B-2-2为试材,采用正交设计L16(45)在4个水平上对影响黄瓜SSR-PCR反应体系的Taq酶浓度、Mg2 含量、模板DNA用量、dNTP浓度及引物用量等5个因素进行了试验优化,并用单因素完全随机试验筛选各反应因素的最佳水平,建立了黄瓜SSR-PCR反应的最佳体系。结果表明:在20μL反应体系中,Taq酶最适浓度为0.5U,Mg2 最适浓度为2.0 mmol/L,模板DNA最适用量为5 ng/μL,dNTP最适用量为0.2 mmol/L,引物最适浓度为0.6μmol/L;引物最佳退火温度为50.0℃。利用20个黄瓜材料验证此反应体系,6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果显示,扩增产物在100~300 bp之间多态性高,且反应体系的稳定性和重复性好。
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| 关 键 词： | 白黄瓜 SSR-PCR 体系优化 |
| 收稿时间： | 2007/11/16 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2007/12/6 0:00:00 |
Optimization of SSR-PCR System for Cucumber Using Orthogonal Design |
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| LI Ya-li,CHEN Shu-xi,MENG Huan-wen,CHENG Zhi-hui and CHAI Dan-dan.Optimization of SSR-PCR System for Cucumber Using Orthogonal Design[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2008,17(3):280-284. |
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| Authors: | LI Ya-li CHEN Shu-xi MENG Huan-wen CHENG Zhi-hui and CHAI Dan-dan |
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| Institution: | College of Horticulture, Northwest A & F University, Yangling Shaanxi 712100, China;College of Horticulture, Northwest A & F University, Yangling Shaanxi 712100, China;College of Horticulture, Northwest A & F University, Yangling Shaanxi 712100, China;College of Horticulture, Northwest A & F University, Yangling Shaanxi 712100, China;College of Horticulture, Northwest A & F University, Yangling Shaanxi 712100, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | White skin cucumber SSR-PCR Reaction system optimization |
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