| 青稞CHS基因的克隆及原核表达分析 |
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| 引用本文： | 方 建,牟 利,李 鹏,张鹍飞,刘新春,袁金娥,冯宗云.青稞CHS基因的克隆及原核表达分析[J].麦类作物学报,2015,35(11):1528-1534. |
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| 作者姓名： | 方 建 牟 利 李 鹏 张鹍飞 刘新春 袁金娥 冯宗云 |
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| 作者单位： | （四川农业大学农学院植物遗传育种学系大麦青稞研究中心，四川成都 611130） |
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| 基金项目： | 国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-05) |
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| 摘 要： | 为进一步研究查尔酮合酶（Chalcone synthase，CHS）在黄酮化合物代谢过程中的作用，以青稞94-19-1为材料，通过同源克隆技术分离CHS基因，并对分离得到的CHS基因进行生物信息学分析及原核表达。结果表明，从青稞94-19-1中克隆得到的CHS基因编码区长为1 197 bp，编码398个氨基酸。生物信息学分析表明，该基因编码的蛋白质分子量为43.479 kDa，预测等电点(pI)为5.92，是酸性蛋白；该酶蛋白体外红细胞中的半衰期为30 h，不稳定系数(II)大于40，属于不稳定蛋白；平均亲水指数为-0.090，是亲水性的蛋白。SDS-PAGE检测结果表明，将该基因克隆到表达载体pET-32a上，并在大肠杆菌BL21中表达，可得到64 kDa左右的融合蛋白，在IPTG诱导浓度为1.0 mmol·L-1时，最佳诱导时间为3 h。
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| 关 键 词： | 青稞 查尔酮合酶 同源克隆 原核表达 |
Cloning and Prokaryotic Expression Analysis of CHS Gene in Hulless Barley |
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| Keywords: | |
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