| 细菌sRNA调控靶标的双质粒筛选系统构建 |
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| 引用本文： | 王洪洋,胡利华.细菌sRNA调控靶标的双质粒筛选系统构建[J].华中农业大学学报,2017,36(6):47-53. |
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| 作者姓名： | 王洪洋 胡利华 |
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| 作者单位： | 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室/蛋白质组学平台(中心),武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31470170） |
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| 摘 要： | 以pMycVec1/pMycVec2载体为基础,构建了筛选和鉴定细菌sRNA调控靶标的双质粒系统。对pMycVec2载体的多克隆位点进行改造,并加入强启动子rrnBp和有效转录终止子,获得可定向克隆和转录sRNA的质粒pMycVec2-D;对pMycVec1载体的多克隆位点进行改造,并加入弱启动子Pwk和有效转录终止子,获得了分别用报告基因lacZ和GFP来检测sRNA靶标序列翻译水平的质粒pMycVec1-lacZ和pMycVec1-GFP。最后,利用2对已知的sRNA与其调控靶标MicC/ompC mRNA和MicF/ompF mRNA,通过β-半乳糖苷酶活性和菌体荧光值检测,表明双质粒系统能有效检测sRNA与调控靶标的互作。
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| 关 键 词： | 细菌 非编码小RNA 双质粒系统 调控靶标 |
| 收稿时间： | 2017/3/23 0:00:00 |
Construction of a two-plasmid system for identifying targets of bacterial sRNA |
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| WANG Hongyang,HU Lihua.Construction of a two-plasmid system for identifying targets of bacterial sRNA[J].Journal of Huazhong Agricultural University,2017,36(6):47-53. |
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| Authors: | WANG Hongyang HU Lihua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bacteria small non-coding RNAs(sRNAs) two-plasmid system regulatory target |
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