牛结节性皮肤病病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立与应用 |
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引用本文: | 伍子昂,南文龙,吴晓东,王怡,王俊荣,高雁怩,白娟,杨振,姜平.牛结节性皮肤病病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立与应用[J].畜牧与兽医,2022(11):100-105. |
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作者姓名: | 伍子昂 南文龙 吴晓东 王怡 王俊荣 高雁怩 白娟 杨振 姜平 |
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作者单位: | 1. 南京农业大学动物医学院/农业农村部动物细菌学重点实验室/“一带一路”国际重大跨境动物疫病诊断与免疫专业科技创新院;2. 中国动物卫生与流行病学中心 |
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基金项目: | 江苏省自然科学基金青年基金项目(BK20210401);;“十三五”国家重点研发计划课题(2017YFF0208602); |
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摘 要: | 牛结节性皮肤病(lumpy skin disease, LSD)是近年来我国新出现的一种牛传染性疾病。本研究根据LSD病毒(LSDV)的LSD022基因保守区域,设计出引物和探针,经过反应条件优化,建立了TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,测试了其敏感性、特异性和重复性。结果发现,本方法敏感性达到15 copies/μL,不与其他牛病病毒和山羊痘弱毒疫苗AV41发生反应,变异系数均小于3%。用本方法和OIE推荐的普通PCR方法检测发病牛场94份临床样品,LSDV检出率分别为62%和37%,其中阳性样品2种方法检测符合率为96.7%,说明本方法敏感性、特异性和重复性较好,可用于LSDV检测。
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关 键 词: | 牛结节性皮肤病 TaqMan探针 实时荧光定量PCR |
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