| 猪JAK-1、JAK-2、STAT-1和STAT-2TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 蔺文成,王晓玲,刘芹防,崔尚金.猪JAK-1、JAK-2、STAT-1和STAT-2TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用[J].中国预防兽医学报,2011,33(11). |
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| 作者姓名： | 蔺文成 王晓玲 刘芹防 崔尚金 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001 |
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| 摘 要： | 为建立定量检测猪Janus激酶(JAK)和信号转导和转录激活因子(STAT) mRNA的TaqMan荧光定量PCR检测方法,本研究针对猪JAK-1,JAK-2,STAT-1、STAT-2及管家基因β-actin的序列设计了特异性的引物和探针,分别构建了各自的阳性重组质粒,建立了TaqMan荧光定量PCR方法.结果表明:所建立的检测方法荧光定量PCR扩增均无非特异性产物的产生；检测下限均达1.0×101 copies/μL;批内及批间变异系数均小于2％.利用该方法对猪细小病毒(PPV)感染ST细胞48 h后JAK-1、JAK-2、STAT-1和STAT-2 mRNA的转录水平进行了检测,结果表明:JAK-1和JAK-2转录水平显著上调,STAT-1和STAT-2转录水平呈现下调趋势,本研究建立的TaqMan荧光定量PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,适于猪细胞传导因子JAK和STAT的定量检测.
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| 关 键 词： | Ⅰ型干扰素 JAK-STAT 荧光定量PCR 检测 |
Development of TaqMan quantitative real-time PCR assay fordetection of porcine JAK-1, JAK-2, STAT-1 and STAT-2 |
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| LIN Wen-cheng,WANG Xiao-ling,LIU Qin-fang,CUI Shang-jin.Development of TaqMan quantitative real-time PCR assay fordetection of porcine JAK-1, JAK-2, STAT-1 and STAT-2[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2011,33(11). |
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| Authors: | LIN Wen-cheng WANG Xiao-ling LIU Qin-fang CUI Shang-jin |
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| Institution: | LIN Wen-cheng,WANG Xiao-ling,LIU Qin-fang,CUI Shang-jin(Division of Swine Infections Disease,State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | type I interferon JAK-STAT real-time PCR detection |
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