布鲁菌S19疫苗株znuA单基因及bp26/znuA双基因缺失株的构建及鉴定 |
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引用本文: | 马思思,王佳莹,刘翠翠,丁红星,吴云燕,赵明秋,陈金顶.布鲁菌S19疫苗株znuA单基因及bp26/znuA双基因缺失株的构建及鉴定[J].中国兽医学报,2015(3):418-424. |
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作者姓名: | 马思思 王佳莹 刘翠翠 丁红星 吴云燕 赵明秋 陈金顶 |
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作者单位: | 华南农业大学兽医学院 |
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基金项目: | 广东省教育部产学研结合资助项目(2011B090400259);公益性行业(农业)科研专项经费资助项目(201203056) |
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摘 要: | 通过等位基因交换,分别敲除牛流产型布鲁菌减毒活疫苗S19株和缺失株S19-Δbp26的znuA基因,构建了布鲁菌znuA基因单缺失株S19-ΔznuA和bp26、znuA基因双缺失株S19-Δbp26-ΔznuA,对获得的2种缺失株进行形态学、生长特性、稳定性和基因测序验证。结果表明,S19株和S19-Δbp26株的znuA基因均成功缺失,生长特性表示2种缺失株与亲本株生长基本无差异;体外连续传至20代,菌落PCR鉴定及基因测序结果显示2种缺失株均遗传稳定。牛流产型布鲁菌单缺失株S19-ΔznuA和双缺失株S19-ΔznuA-Δbp26的成功构建为布鲁菌新型疫苗的研发、布鲁菌感染动物过程中ZnuA蛋白的作用机理及其与Bp26蛋白之间关系的研究奠定了基础。
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关 键 词: | 布鲁菌 znuA基因 基因缺失株 |
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