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中国荷斯坦奶牛IL-18基因的克隆与真核表达研究
引用本文:乔军,孟庆玲,陈创夫,才学鹏,刘佳旭,任艳,张辉.中国荷斯坦奶牛IL-18基因的克隆与真核表达研究[J].江苏农业科学,2009(4).
作者姓名:乔军  孟庆玲  陈创夫  才学鹏  刘佳旭  任艳  张辉
作者单位:1. 石河子大学动物科技学院,新疆石河子,832003;中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州,730046
2. 石河子大学动物科技学院,新疆石河子,832003
3. 中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州,730046
基金项目:新疆生产建设兵团博士基金  
摘    要:为了克隆并表达中国荷斯坦奶牛白介素18(interleukin,IL-18)基因,用牛白介素18基因特异性引物对刀豆蛋白(ConA)刺激后荷斯坦奶牛外周血单核细胞(PBMCb)总RNA进行RT-PCR扩增,并将扩增产物纯化后克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定,将目的基因亚克隆到真核表达载体pGFP-C1中,构建了重组质粒pGFP-IL-18,转染BHK-21细胞,检测目的基因是否表达.结果:该基因全长582 bp,编码193个氨基酸,与羊、犬和猪IL-18基因相比,核苷酸序列有较高的同源性,但与小鼠和鸡IL-18基因相比有明显的种属差异,转染48 h后,可在转染细胞胞浆中检测到黄绿色的荧光,表明已成功克隆了中国荷斯坦奶牛IL-18基因,并实现了该基因在真核细胞中的表达.

关 键 词:白介素-18基因  克隆  真核表达  中国荷斯坦奶牛

Cloning and eukaryotic expression of interleukin-18 gene of Chinese bovine
Abstract:
Keywords:
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