| 柞蚕核型多角体病毒实时荧光LAMP检测方法的初步建立 |
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| 引用本文： | 张洋,薛强,金英,李凤芹,闫伟.柞蚕核型多角体病毒实时荧光LAMP检测方法的初步建立[J].蚕业科学,2017,43(6):957-961. |
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| 作者姓名： | 张洋 薛强 金英 李凤芹 闫伟 |
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| 作者单位： | 吉林省蚕业科学研究院,吉林吉林,132112;吉林省农业科学院,长春,130124 |
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| 基金项目： | 吉林省财政行业与基本课题项目 |
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| 摘 要： | 柞蚕脓病是柞蚕生产上的主要病害之一,病原为柞蚕核型多角体病毒(Ap NPV)。建立快速而准确检测蚕体样品中Ap NPV的技术,将有助于对病害的早期诊断及流行病学调查和实施有效的防控措施。以柞蚕核型多角体病毒ORF142基因为靶基因,设计2组特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,利用实时荧光PCR技术进行检测分析。结果表明,设计与合成的2组引物均能对柞蚕核型多角体病毒基因组扩增出特异性产物,其中引物组2在63℃开始孵育60 min,反应起始扩增时间为12 min,当反应时间达到40 min时,扩增曲线的最大相对荧光强度(RFU)值达6 000,相对于引物组1具有更好的及时性,可缩短一半反应起始时间。初步建立的Ap NPV实时荧光LAMP检测方法相对于传统PCR方法,检测效率提高4倍左右。
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| 关 键 词： | 柞蚕核型多角体病毒 环介导等温扩增技术 引物 反应条件 早期诊断 |
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