| 鸡胚致死孤儿病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 王淑菁,付瑞,李晓波,王吉,岳秉飞.鸡胚致死孤儿病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用[J].兽医导刊,2017(16). |
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| 作者姓名： | 王淑菁 付瑞 李晓波 王吉 岳秉飞 |
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| 作者单位： | 中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所,北京,100050 |
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| 摘 要： | 目的:建立鸡胚致死孤儿病毒CELO的荧光定量PCR检测方法,实现该病毒在鸡胚及禽源性生物制品中的快速检测.方法根据CELO L5纤突1序列设计引物和探针,建立荧光定量PCR检测方法,并对其线性、特异性、精密性、灵敏度进行考察.运用建立的方法对40份SPF鸡胚尿囊液和16株流感疫苗主种子批毒种进行CELO检测.结果:建立的荧光定量PCR其最佳线性范围为1x109~1x104拷贝/μl,R2值达0.99以上,特异性良好,与其他种属的腺病毒及流感病毒间均无交叉反应,灵敏度为102拷贝/μl;荧光定量PCR方法检测40份SPF鸡胚尿囊液和16株流感毒种结果为阴性.结论:本研究所建立的鸡胚致死孤儿病毒荧光定量PCR检测方法,特异性好,敏感性高,为鸡胚及禽源性生物制品中的快速检测提供了技术支撑.
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| 关 键 词： | 鸡胚致死孤儿病毒 荧光定量PCR 鸡胚 |
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