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| 小麦热激蛋白WHSP90基因的原核表达及多克隆抗体制备 | |
| 引用本文： | 李琳,徐兆师,刘丽,于卓,李连城,陈明,马有志.小麦热激蛋白WHSP90基因的原核表达及多克隆抗体制备[J].麦类作物学报,2009,29(3). |
| 作者姓名： | 李琳 徐兆师 刘丽 于卓 李连城 陈明 马有志 |
| 作者单位： | 1. 内蒙古农业大学农学院,内蒙古呼和浩特,010019;国家农作物基因资源和基因改良重大科学工程,农业部作物遗传育种重点开放实验室,中国农业科学院作物科学研究所,北京,10081 2. 国家农作物基因资源和基因改良重大科学工程,农业部作物遗传育种重点开放实验室,中国农业科学院作物科学研究所,北京,10081 3. 内蒙古农业大学农学院,内蒙古呼和浩特,010019 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家高技术研究发展计划(863计划) |
| 摘 要： | 为了进一步研究HSP90基因的功能,将WHSP90基因构建到原核表达载体pET-28a(+)中,得到His-WHSP90融合表达载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,发现1 mmol/L IPTG诱导4 h蛋白表达量最大;经过蛋白标记亲和层析柱(HisTrapTMHP)纯化得到的纯化蛋白浓度达到0.4 mg/mL.免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法检测免疫后家兔抗血清效价大于125 000,满足后续试验要求的效价值,为在蛋白水平上研究WHSP90基因功能提供了基础. |
| 关 键 词： | 小麦 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体 |
Expression of Wheat Heat Shock Protein WHSP90 Gene and Preparation of Its Polyclonal Antibodies |
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| LI Lin,XU Zhao-shi,LIU Li,YU Zhuo,LI Lian-cheng,CHEN Ming,MA You-zhi.Expression of Wheat Heat Shock Protein WHSP90 Gene and Preparation of Its Polyclonal Antibodies[J].Journal of Triticeae Crops,2009,29(3). | |
| Authors: | LI Lin XU Zhao-shi LIU Li YU Zhuo LI Lian-cheng CHEN Ming MA You-zhi |
| Abstract: | To investigate the function of the WHSP90 gene,the WHSP90 gene was inserted into the pET-28a(+) vector to get fusion vector His-WHSP90,then transformed into E.coli BL21(DE3) cells.The most high expression quantity was induced by 1 mmol/L IPTG at 4 h.The protein was purified using HisTrapTMHP,and the concentration of purified protein was 0.4 mg/mL.The purified protein was injected into a rabbit,and the titer of the rabbit's anti-serum was measured by indirect ELISA.The rabbit's antiserum with high titer(>125... |
| Keywords: | HSP90 |
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