| 牛肌肉卫星细胞向胰岛素分泌细胞的诱导转分化研究 |
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| 引用本文： | 赵云杰,魏著英,李欣欣,白春玲,杨慧娣,李光鹏.牛肌肉卫星细胞向胰岛素分泌细胞的诱导转分化研究[J].农业生物技术学报,2016(2):224-232. |
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| 作者姓名： | 赵云杰 魏著英 李欣欣 白春玲 杨慧娣 李光鹏 |
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| 作者单位： | 1. 内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室,呼和浩特,010070;2. 内蒙古医科大学基础医学院生理教研室,呼和浩特,010110 |
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| 基金项目： | 内蒙古自治区科技厅重大基础研究开放课题(No.20130902) |
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| 摘 要： | 肌肉卫星细胞是源自中胚层的肌源干细胞,具有增殖分化融合成肌管并形成肌细胞的能力.在体内条件下,肌肉卫星细胞不可能跨胚层分化为内胚层来源的胰腺细胞.本研究从牛(Bos taurus)胎儿肌肉中分离培养得到肌肉卫星细胞,并在体外条件下将其诱导成胰岛素分泌细胞.在诱导过程中,分析了与胰腺发育相关的胰十二指肠同源基因盒1基因(pancreatic and duodenal homeobox 1,PDX1)、神经原素3基因(neurogenin 3,NGN3)、淀粉酶基因(Amylase)和胰岛素基因(Insulin,INS)的动态表达情况.结果表明,PDX1作为决定胰腺分化发育和胰岛功能的主要调节基因,在诱导分化的第2天能够检测到其mRNA的表达,在第3天表达量达到了最大,第4天以后维持在较低水平.NGN3是内分泌细胞形成非常重要的转录因子,是能够将胰岛素分泌到胞外的关键基因,其mRNA在分化诱导的第3天开始表达,第4天达到最高水平,之后逐渐下降.Amylase是胰腺发育中细胞外分泌相关的基因,Amylase mRNA在第6天才开始表达,8d后达到最高.INS mRNA表达量在11～12 d最高,酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)发现,诱导形成的胰腺细胞能够正常分泌胰岛素,培养液中胰岛素的浓度在诱导的11～12 d达到最高值.向培养液中添加葡萄糖后,可使细胞的胰岛素分泌量显著提高,说明诱导得到的细胞类似于成体胰岛的功能,其胰岛素分泌受外界葡萄糖浓度的调节.上述结果表明,肌肉卫星细胞可以被诱导转分化为胰岛素分泌细胞,并对培养环境中的葡萄糖刺激做出应答反应.本研究结果为进一步的研究和临床应用提供基础资料.
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| 关 键 词： | 肌肉卫星细胞 定向分化 胰腺细胞 胰岛素分泌 |
Trans-differential Induction of Bovine (Bos taurus) Muscle Satellite Cells into Pancreatic Cells |
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| Keywords: | Muscle satellite cells Directed differentiation Pancreatic cells Insulin secretion |
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