| 霜霉威胁迫下黄瓜CsWRKY30表达及功能分析 |
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| 引用本文： | 李胜男,秦智伟,辛明,周秀艳.霜霉威胁迫下黄瓜CsWRKY30表达及功能分析[J].中国农业科学,2016,49(7):1277-1288. |
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| 作者姓名： | 李胜男 秦智伟 辛明 周秀艳 |
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| 作者单位： | 东北农业大学园艺学院/农业部东北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室，哈尔滨150030 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31272158） |
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| 摘 要： | 【目的】从前期转录组测序结果中筛选获得一个在霜霉威(propamocarb)胁迫条件下差异上调表达的基因CsWRKY30，对其进行克隆并分析其在霜霉威胁迫下的功能,了解黄瓜低霜霉威残留的分子机制。【方法】通过PCR技术扩增CsWRKY30全长，利用NCBI和PlantCARE在线工具分别进行该基因编码蛋白的保守结构域分析和启动子序列分析；利用实时荧光定量PCR分析CsWRKY30在霜霉威胁迫及其他胁迫条件下的相关表达模式；通过与GFP蛋白融合对CsWRKY30蛋白进行亚细胞定位；通过花序侵染法将CsWRKY30构建的植物过表达载体转化到哥伦比亚野生型拟南芥中，对获得的纯合转基因株系在霜霉威胁迫条件下的功能进行鉴定。【结果】CsWRKY30的CDS序列全长为1 014 bp，其编码的337个氨基酸中包含1个由60个氨基酸组成的WRKY结构域。CsWRKY30表达模式分析结果显示，黄瓜遭受霜霉威胁迫时，CsWRKY30在低霜霉威残留品系D0351中表达量显著上调，而在高霜霉威残留品系D9320中表达量并没有发生改变；在霜霉威胁迫的0.5-9 h间，该基因在D0351中的表达量一直明显高于对照，然而在24 h以后，该基因的表达不再显著上调。组织特异性表达分析表明，CsWRKY30主要在黄瓜果实中表达。蛋白亚细胞定位结果表明，CsWRKY30定位于细胞核。对CsWRKY30转基因拟南芥进行霜霉威胁迫发现，在未处理条件下，CsWRKY30 转基因拟南芥与野生型拟南芥表型上无明显差异；在2 mmol?L-1霜霉威处理条件下，CsWRKY30转基因拟南芥萌发率及主根长均明显高于野生型拟南芥。在其他逆境作用下，CsWRKY30对霜霉威和多主棒孢霉菌条件积极响应，对干旱和高盐没有作用，同时受到脱落酸（ABA）信号诱导。【结论】黄瓜CsWRKY30在霜霉威胁迫条件下发挥重要作用，过量表达CsWRKY30可显著提高转基因拟南芥对霜霉威胁迫的抵抗能力。
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| 关 键 词： | 黄瓜 CsWRKY30 霜霉威 功能分析 |
| 收稿时间： | 2015-12-31 |
Expression and Functional Analysis of CsWRKY30 in Cucumber Under Propamocarb Stress |
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| LI Sheng-nan,QIN Zhi-wei,XIN Ming,ZHOU Xiu-yan.Expression and Functional Analysis of CsWRKY30 in Cucumber Under Propamocarb Stress[J].Scientia Agricultura Sinica,2016,49(7):1277-1288. |
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| Authors: | LI Sheng-nan QIN Zhi-wei XIN Ming ZHOU Xiu-yan |
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| Institution: | College of Horticulture, Northeast Agricultural University/Key Laboratory of Biology and Germplasm Creation for Horticultural Crops, Ministry of Agriculture, Harbin 150030 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cucumber CsWRKY30 propamocarb function analysis
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