| 伪狂犬病病毒gE基因荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 李雪明,于红欣,杨红杰,王俊,周双海.伪狂犬病病毒gE基因荧光定量PCR检测方法的建立[J].北京农学院学报,2015,30(4):74-77. |
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| 作者姓名： | 李雪明 于红欣 杨红杰 王俊 周双海 |
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| 作者单位： | 北京农学院动物科学技术学院,北京102206;北京市顺义区动物疫病预防控制中心,北京101300;北京农学院动物科学技术学院,北京,102206 |
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| 基金项目： | 天津市宁河原种猪场科技计划项目 |
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| 摘 要： | 伪狂犬病病毒(PRV)野毒有gE基因,而其疫苗毒株无gE基因,这为检测有无PRV野毒感染提供参考。用PCR方法扩增PRV的gE基因片段,构建含有PRV gE基因片段的重组质粒。以系列稀释后的重组质粒作为模板,应用SYBR GreenⅠ来进行检测PRV gE基因的实时荧光定量PCR扩增。结果显示:在(6.9×107~6.9×101)copies/μL范围内,相邻扩增曲线之间间距均匀,所有产物具有单一整齐的熔解曲线峰,标准曲线具有优良的线性关系。该方法最低可准确检测69copies/μL的核酸模板,重复性试验的变异系数小于2%,对PRV-gE基因缺失疫苗毒株和常见猪源DNA病毒的检测结果均为阴性,对临床样品的检出率高于常规PCR方法。研究结果表明,建立了1种特异性强、灵敏度高、重复性好的检测PRV gE基因的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,可用于PRV野毒感染的定量检测。
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| 关 键 词： | 伪狂犬病病毒 gE基因 荧光定量PCR 伪狂犬病病毒野毒 |
Development of a fluorescent quantitative PCR assay for detection of pseudorabies virus gE gene |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pseudorabies virus gE gene fluorescent quantitative PCR wild-type PRV |
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